Question

【題目】中國倉鼠卵巢細胞（CHO細胞）能夠高效表達外源基因。科學研究中常使用重組CHO細胞（導入了重組載體的CHO細胞）大量生產外源蛋白，一般步驟為：Ⅰ.長期傳代培養，獲得大量重組細胞；Ⅱ.批式培養，獲得大量外源蛋白。

（1）體外培養動物細胞的基本培養液（BM）中除抗生素和一般營養物質外，還應含有_______。為了獲得能生產抗體A的重組 CHO 細胞，需要將含有抗體A基因的重組載體通過________法導入CHO細胞，經篩選獲得重組CHO 細胞。

（2）研究發現，酵母抽提物（YE）在動物細胞培養和促進蛋白質表達中具有重要作用。為確定YE在不同培養階段的使用策略，研究人員進行了下列實驗。

①圖1所示實驗探究了在長期傳代培養階段________對重組CHO細胞增殖以及抗體A表達量的影響。通過細胞計數和計算得出實驗結果如圖2所示，結果說明________。此處理對后續批式培養中的細胞增殖及單個細胞的抗體產量基本無影響。

②進一步探究YE對批式培養階段的影響，應在階段Ⅰ、Ⅱ分別使用___________和________進行培養。結果表明，抗體A的總產量隨著 YE 濃度的提高而增加。

③綜上所述，為提高抗體A的總產量，整個培養過程中對YE的使用策略是________。

Answer 1

【答案】 動物血清 顯微注射 不同濃度的YE 較低濃度YE促進細胞增殖，較高濃度YE抑制細胞增殖 BM 添加不同濃度YE的BM 傳代培養過程中添加低濃度YE，批式培養過程中添加高濃度YE

【解析】試題分析：本題考查基因工程、細胞工程，考查對基因工程操作步驟、動物細胞培養條件的理解。解答此題，可根據不同培養階段YE作用的不同特點選擇提高抗體A的總產量的策略。

（1）體外培養動物細胞的基本培養液（BM）中除抗生素和一般營養物質外，一般加入動物血清，以滿足細胞生命活動的需要。將重組載體導入動物細胞，一般選用顯微注射法。

（2）①圖1所示實驗不同組實驗的自變量是YE的不同濃度，探究的是在長期傳代培養階段不同濃度的YE對重組CHO細胞增殖以及抗體A表達量的影響。根據圖2可知，長期傳代培養階段YE濃度為1g/L時細胞數目最多，較低濃度YE促進細胞增殖，較高濃度YE抑制細胞增殖。

②圖1所示實驗探究了在長期傳代培養階段不同濃度的YE對重組CHO細胞增殖以及抗體A表達量的影響，探究YE對批式培養階段的影響，可將圖示1培養步驟顛倒，應在階段Ⅰ使用BM進行培養，在階段Ⅱ添加不同濃度YE的BM。

③長期傳代培養階段YE濃度為1g/L時細胞數目最多，較低濃度YE促進細胞增殖，較高濃度YE抑制細胞增殖，該處理對后續批式培養中的細胞增殖及單個細胞的抗體產量基本無影響；批式培養階段抗體A的總產量隨著 YE 濃度的提高而增加，因此為提高抗體A的總產量，可在傳代培養過程中添加低濃度YE，批式培養過程中添加高濃度YE。