Question

1．在分離、純化大腸桿菌實驗中，劃線接種（甲）、培養結果（乙）如下圖．有關敘述錯誤的是（　　）

• A． 接種前應對培養基進行髙壓蒸汽滅菌
• B． 連續劃線的目的是獲得單個細菌形成的菌落
• C． 接種過程中至少需要對接種環灼燒5次
• D． 甲中a區域為劃線的起始位置

Answer 1

分析 平板劃線的操作的基本步驟是：
（一）、右手持接種環，經火焰滅菌，待涼后，在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞，并將試管口過火焰，將以冷卻的接種環伸入菌液，沾取一環菌液，將試管口過火焰丙塞上棉塞．
（二）、左手斜持瓊脂平板，皿蓋打開一條縫，右手于火焰近處將接種環迅速伸入平板內，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，接種環不應劃破培養基表面．
（三）、燒灼接種環，殺滅環上殘留菌液，待冷卻（是否冷卻，可先在培養基邊緣處試觸，若瓊脂溶化，表示未涼，稍等再試），從第一區域劃線的末端開始往第二區內劃線，重復以上操作，在第三四五區內劃線，注意不要將最后一區的劃線與第一區相連．
（四）、將平板倒置，放入培養箱中培養．

解答 解：A、培養基一般用髙壓蒸汽滅菌，A正確；
B、菌液經過連續劃線，菌液中的菌體越來越少，最后容易形成單菌落，B正確；
C、在每次劃線前后都要對接種環進行滅菌，因此按照圖中劃線順序（d→c→b→a），整個劃線過程中需要對接種環進行灼燒的次數為5次，C正確；
D、每次劃線的菌種來自上一區域的末端，因此劃線的起始區域菌落更多，由圖乙可知，甲中d區域菌落多，為劃線的起始位置，D錯誤．
故選：D．

點評 本題主要考查平板劃線法的操作步驟及摘要事項，意在提高學生實驗中無菌操作意識和相關實驗技能．