Question

17．人乳頭狀瘤病毒（HPV）與宮頸癌的發生密切相關，抗HPV的單克隆抗體可以準確檢測出HPV，從而及時監控宮頸癌的發生，以下是以HPV衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體的過程，請據圖回答：

（1）單克隆抗體制備過程中涉及的細胞工程技術有動物細胞培養、動物細胞融合．
（2）將經融合處理后的細胞轉到HAT接著基上培養的目的是篩選出雜交瘤細胞，該細胞能（填“能”“不能”）產生專一性抗體，所產生的抗體不一定（填“一定”，“不一定”）能抗HPV．
（3）對于抗體檢測呈陽性的雜交克隆應進行克隆化培養，克隆化培養的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細胞到3～10個/mL，每孔加入細胞稀釋液0.1mL（填“0.1”“1”或“10”），使每個孔內不多于一個細胞，達到單克隆培養的目的．
（4）科學家從某些無限增殖細胞的細胞質中分離出了無限增殖調控基因（prG），該基因能激發動物細胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更多的思路．除本題描述的一種制備單克隆抗體技術外，請再簡要寫出一種制備單克隆抗體的思路通過基因工程向漿細胞中導入prG；
利用核移植技術將漿細胞的細胞核移植到去核的無限增殖細胞中．

Answer 1

分析 單克隆抗體制備流程：
（1）對小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠產生免疫反應；（2）得到相應的B淋巴細胞；（3）將小鼠骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合，再用特定的選擇培養基進行篩選；（4）在該培養基上，未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡，只有融合的雜種細胞才能生長（這種雜種細胞的特點是既能迅速大量繁殖又能產生專一的抗體）（5）對上述雜交瘤細胞還需進行克隆化培養和抗體檢測，經多次篩選，就可獲得足量的能分泌所需抗體的細胞；（6）最后，將雜交瘤細胞在體外條件下做大規模培養，或注射到小鼠腹腔內增殖，這樣，從細胞培養液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的單克隆抗體．

解答 解：（1）單克隆抗體制備過程中涉及的細胞工程技術有動物細胞培養、動物細胞融合．
（2）看圖分析可知：小鼠骨髓瘤細胞不能在HAT培養基上生長，但是沒有說能不能生存，只是不能增殖，正常細胞也能在HAT培養基上存活，故①無抗體分泌的細胞、②抗HPV抗體的分泌細胞、③其它無關抗體的分泌細胞都能在HAT培養基上存活，但是能夠增重的只有雜交瘤細胞．將經融合處理后的細胞轉到HAT接著基上培養的目的是篩選出雜交瘤細胞，該細胞能產生專一性抗體，所產生的抗體不一定能抗HPV．
（3）對于抗體檢測呈陽性的雜交克隆應盡早進行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細胞到3～10個細胞/mL，每孔加入細胞稀釋液0.1mL，使每個孔內不多于一個細胞，達到單克隆培養的目的．
（4）由于調控細胞無限增殖的prG基因位于細胞質中，因此若要采用細胞核移植獲得單克隆抗體時，只能講漿細胞的細胞核移入到含有prG基因的細胞質中，獲得重組細胞，最終獲得單克隆抗體．
故答案為：
（1）動物細胞培養、動物細胞融合
（2）篩選出雜交瘤細胞      能     　不一定
（3）陽　   0.1
（4）通過基因工程向漿細胞中導入prG；
利用核移植技術將漿細胞的細胞核移植到去核的無限增殖細胞中

點評 本題考查了單克隆抗體的制備過程和動物細胞培養等相關知識，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯系的能力．