Question

4．科學家從某些能無限增殖的細胞質中分離出無限增殖的調控基因（prC），該基因能激發許多動物細胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景．請回答以下問題．
（1）利用細胞融合技術制備單克隆抗體，促進動物細胞融合常用的誘導劑是滅活的病毒．
（2）利用細胞融合技術制備單克隆抗體時有兩次篩選，第2次篩選的目的是篩選出能產生所需抗體的雜交瘤細胞．
（3）有人提出，可以直接通過基因工程導入該調控基因來制備單克隆抗體，其思路如圖1所示．請回答下列問題．

①酶B是指DNA連接酶．
②題目中Ⅱ所指的細胞是漿細胞，Ⅲ所指的細胞具有的特點是既能無限增殖又能產生特定抗體．
（4）也有人提出用細胞核移植技術構建重組細胞來生產單克隆抗體，試用相關的圖示及文字在圖2中表示該過程：
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Answer 1

分析 傳統的單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養雜交瘤細胞（體內培養和體外培養），最后獲取單克隆抗體．
基因工程的方法：由于效應B細胞沒有細胞增殖的能力，因此選擇“無限增殖調控基因（prG）”作為目的基因，“效應B細胞”作為受體細胞，以期望獲得既能無限增殖、又能產生特異性抗體的效應B細胞．
細胞核移植技術生產單克隆抗體：由于某些能無限增殖的細胞的細胞質中含有無限增殖調控基因（prG），因此在細胞核移植時，選擇效應B細胞的細胞核和骨髓瘤細胞的細胞質進行細胞核移植．

解答 解：（1）利用細胞融合技術制備單克隆抗體，促進動物細胞融合常用的誘導因素是滅活的病毒．
（2）利用細胞融合技術制備單克隆抗體時有兩次篩選，第1次篩選的目的是篩選出雜交瘤細胞，第2次篩選的目的是篩選出能產生所需抗體的雜交瘤細胞．
（3）①在基因工程中，獲取目的基因和質粒需要使用限制酶，然后在DNA連接酶的作用下形成重組質粒．
②題目中Ⅱ所指的細胞是能產生抗體的漿細胞，Ⅲ所指的是導入無限增殖的調控基因（prC）的漿細胞具有的特點是
既能無限增殖又能產生特定抗體．
（4）由于調控細胞無限增殖的prG基因位于細胞質中，因此若要采用細胞核移植獲得單克隆抗體時，只能講漿細胞的細胞核移入到含有prG基因的細胞質中，獲得重組細胞，最終獲得單克隆抗體．如圖：

故答案為：
（1）滅活的病毒
（2）篩選出能產生所需抗體的雜交瘤細胞
（3）①DNA連接酶
②漿細胞　既能無限增殖又能產生特定抗體
（4）如圖

點評 本題考查基因工程、動物細胞核移植和單克隆抗體的制備過程，比較綜合．答題時要注意題干中的信息，如利用細胞核移植獲得單克隆抗體時，只能將漿細胞的細胞核移植到去核的含有prG基因的細胞質中，因為根據題干可知，prG基因只存在于能無限增殖細胞的細胞質中．