Question

科學家將人的生長素基因與大腸桿菌的DNA分子進行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達．過程如下圖，據圖回答：
（1）過程（1）表示的是采取

 

的方法來獲取目的基因．
（2）圖中（2）所示含有目的基因的DNA（質粒）的形成需要的酶包括：
“分子手術刀”：

 

“分子縫合針”：

 

質粒在基因工程中的作用是作為

 

的載體，

 

也可以作為載體．
（3）圖中（3）過程用人工方法，使體外重組的DNA分子轉移到受體細胞內，一般將受體大腸桿菌用

 

處理，使細胞成為

 

，使含有目的基因的重組質粒容易進入受體細胞．檢測大腸桿菌B是否導入了質粒或重組質粒，可采用的方法是將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有氨芐青霉素的培養基上，若細菌能夠生長，說明：已導入了重組質粒或

 

因為：

 

．
（4）基因工程的第四步工作中，檢測目的基因是否插入受體細胞的DNA上要用到技術．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：分析題圖：圖示是將人的生長素基因與大腸桿菌的DNA分子進行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達的過程．圖中（1）表示采用人工合成法合成目的基因（生長素基因）；（2）為基因表達載體；（3）表示將目的基因導入受體細胞；

解答： 解：（1）由圖可知，過程（1）表示以生長素的RNA為模板反轉錄合成目的基因．
（2）基因工程的“分子手術刀”是指限制性核酸內切酶；“分子縫合針”是指DNA連接酶；質粒是基因工程中常用的載體，其作用將目的基因導入受體細胞；此外基因工程常用的載體還有λ噬菌體的衍生物、動植物病毒也．
（3）圖中（3）是將目的基因導入受體細胞的過程，當受體細胞是微生物細胞是，常采用感受態細胞法，即用Ca²⁺處理微生物細胞，使細胞成為易于吸收周圍環境中DNA分子的感受態細胞．由圖可知，構建基因表達載體時，由于目的基因的插入導致四環素抗性基因被破壞，但氨芐青霉素抗性基因完好，因此含有重組質粒或普通質粒A的大腸桿菌能在含有抗氨芐青霉素的培養基上生存．
（4）檢測目的基因是否插入受體細胞的DNA上常用DNA分子雜交技術．
故答案為：
（1）反轉錄 
（2）限制性核酸內切酶   DNA連接酶    基因進入受體細胞   λ噬菌體的衍生物、動植物病毒
（3）Ca²⁺   感受態細胞   質粒A    普通質粒A和重組質粒上都有抗氨芐青霉素基因 
（4）DNA分子雜交技術

點評：本題結合轉基因大腸桿菌的培育過程圖，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的工具及作用；識記基因工程的操作步驟及各步驟采用的方法和注意事項，能結合圖中信息答題．