Question

4．用超聲波處理煙草基因組DNA后，用下列哪一個工程酶處理可以獲得平末端片段，用于后續克隆：（　　）

• A． 限制性內切酶
• B． 大腸桿菌DNA聚合酶
• C． Klenown片段
• D． 反轉錄酶

Answer 1

分析 酶工程就是將酶或者微生物細胞，動植物細胞，細胞器等在一定的生物反應裝置中，利用酶所具有的生物催化功能，借助工程手段將相應的原料轉化成有用物質并應用于社會生活的一門科學技術．它包括酶制劑的制備，酶的固定化，酶的修飾與改造及酶反應器等方面內容．

解答 解：超聲波處理煙草基因組DNA后，隨機將目的DNA斷裂成平末端或黏膜端．A是用于切割，D是用于逆轉錄，C為Klenow片段，又名DNA聚合酶I大片段（克列諾片段或稱克列諾酶）：E．coli DNA聚合酶Ⅰ經胰蛋白酶或枯草桿菌蛋白酶部分水解生成的C末端605個氨基酸殘基片段．該片段保留了DNA聚合酶I的5ˊ-3ˊ聚合酶和3ˊ-5ˊ外切酶活性，但缺少完整酶的5ˊ-3ˊ外切酶活性．DNA聚合酶I（DNA-pol I）斷開后的存在另一個323個氨基酸殘基片段，保留5‘-3’外切酶活性，一般用于cDNA第二鏈的合成，填補DNA單鏈為雙鏈．DNA聚合酶可以直接在脫氧核苷酸鏈片段的3’末端直接添加單個脫氧核苷酸補平雙鏈．因此用超聲波處理煙草基因組DNA后，用大腸桿菌DNA聚合酶處理可以獲得平末端片段，用于后續克隆
故選：B

點評 解答此類題目的關鍵是理解掌握酶工程和過程和原理．