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現(xiàn)有甲乙兩種可能有一定毒性的化學(xué)物質(zhì).實(shí)驗(yàn)室研究人員欲通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法來(lái)鑒定它們是否有毒性并比較二者毒性的強(qiáng)弱.請(qǐng)你以一個(gè)研究人員的身份參與此項(xiàng)研究.完成下列實(shí)驗(yàn)報(bào)告并回答有關(guān)問(wèn)題.Ⅰ.實(shí)驗(yàn)原理: .根據(jù)這種變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù).可判斷該化學(xué)物質(zhì)的毒性.Ⅱ.實(shí)驗(yàn)材料:活小白鼠胚胎.Ⅲ.藥品用具:胰蛋白酶.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液.動(dòng)物細(xì)胞固定液.適宜濃度的龍膽紫溶液.滴管.培養(yǎng)皿.剪刀.錐形瓶.培養(yǎng)瓶.恒溫箱.載玻片.蓋玻片.顯微鏡.小白鼠正常體細(xì)胞有絲分裂各時(shí)期高倍顯微照片.Ⅳ.實(shí)驗(yàn)步驟:(1)制備細(xì)胞懸浮液:把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎.加入胰蛋白酶.使胚胎組織 .再加入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液.制成細(xì)胞懸浮液.(2)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng):①取A.B.C三個(gè)潔凈的培養(yǎng)瓶. .②向A培養(yǎng)瓶中加入化學(xué)物質(zhì)甲.向B培養(yǎng)瓶中加入等量的化學(xué)物質(zhì)乙.并將培養(yǎng)瓶搖勻.③ .(3)制作臨時(shí)裝片:①當(dāng)細(xì)胞增殖到大約8代左右時(shí).同時(shí)從恒溫箱中取出三個(gè)培養(yǎng)瓶.用胰蛋白酶液處理.使培養(yǎng)的細(xì)胞從瓶壁上脫落.再加入動(dòng)物細(xì)胞固定液以迅速殺死細(xì)胞并固定細(xì)胞分裂相.②靜置一段時(shí)間后.分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細(xì)胞懸浮液.滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號(hào)的載玻片的中央. .3-5分鐘后.蓋上蓋玻片.(4)鏡檢和統(tǒng)計(jì):把臨時(shí)裝片放在顯微鏡下.先用低倍鏡后用高倍鏡.尋找處于 期的細(xì)胞.并與 對(duì)比以確認(rèn)發(fā)生變異的細(xì)胞.同時(shí)統(tǒng)計(jì)該期變異的細(xì)胞的Q值. 查看更多

 

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