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mtDNA是存在于人類細胞線粒體中雙鏈閉合環狀的DNA分子，具有自我復制、轉錄和控制合成蛋白質的功能。mtDNA的類型具有明顯的種族特異性。若用兩種識別切割序列完全不同的限制酶M和N切割某人的mtDNA，通過凝膠電泳分離分析得下表。限制酶M和N的識別序列和切割位點如圖所示。

⑴．該mtDNA的長度為___________kb。在該DNA分子中，M酶與N酶的切割位點分別有____________個。

⑵．M酶與N酶切出的能相互粘連的末端能在______________酶的作用下相互連接，請將連接的結果表示出來：_______________________。連接后的序列是否可以用M酶、N酶進行切割，并簡述理由：_________________________________________________

⑶．有人認為mtDNA能成為研究人類起源與進化的一個有力工具，請簡述理由：_________________________________________________________________________ 。

下圖為真核細胞的某基因的結構圖以及限制酶M和N的切割位點。

⑷．現用該基因作為目的基因，若采用直接從供體細胞中分離，具體方法是：_____________。這個方法雖操作方便，但切割下的基因中含有不能指導蛋白質合成的區域。因此，目前往往采用逆轉錄的人工合成的方法，其基本步驟是：__________________________。

⑸．已知Ⅱ區的堿基數是2000個，其中陰影區域堿基數是800個，空白區域中G和C的總數共有400個，則由該區轉錄的mRNA中A和U總數是               。

（5分）番茄果實成熟過程中，某種酶（PG）開始合成并顯著增加，促使果實變紅變軟，但不利于長途運輸和長期保鮮。科學家利用反義RNA技術（見圖解），可有效解決此問題。該技術的核心是：從番茄體細胞中獲得指導PG合成的信使RNA，繼而以該信使RNA為模板，人工合成反義基因并將之導入離體番茄體細胞，經組織培養獲得完整植株；新植株在果實發育過程中，反義基因經轉錄產生的反義RNA與細胞原有mRNA（靶mRNA）互補形成雙鏈RNA，阻止靶mRNA進一步翻譯形成PG，從而達到抑制果實成熟的目的。請結合圖解回答：

（1）反義基因像一般基因一樣是一段雙鏈的DNA分子，合成該分子的第一條鏈時，使用的模板是細胞質中的信使RNA，原料是四種      　　　　，所用的酶是     　　　 。

（2）將人工合成的反義基因導入番茄葉肉細胞原生質體的運輸工具是__________；該目的基因與運輸工具相結合需要使用的酶有______________；在受體細胞中該基因指導合成的最終產物是_____________________

（14分）番茄果實成熟過程中，某種酶（PG）開始合成并顯著增加，促使果實變紅變軟。但不利于長途運輸和長期保鮮。科學家利用反義RNA技術（見圖解），可有效解決此問題。該技術的核心是，從番茄體細胞中獲得指導PG合成的信使RNA，繼而以該信使RNA為模板人工合成反義基因并將之導入離體番茄體細胞，經組織培養獲得完整植株。新植株在果實發育過程中，反義基因經轉錄產生的反義RNA與細胞原有mRNA（靶mRNA）互補形成雙鏈RNA，阻止靶mRNA進一步翻譯形成PG，從而達到抑制果實成熟的目的。請結合圖解回答：

（1）反義基因像一般基因一樣是一段雙鏈的DNA分子，合成該分子的第一條鏈時，使用的模板是細胞質中的信使RNA，原料是四種                  ，所用的酶是                      。

（2）開始合成的反義基因第一條鏈是與模板RNA連在一起的雜交雙鏈，通過加熱去除RNA，然后再以反義基因第一條鏈為模板合成第二條鏈，這樣一個完整的反義基因被合成。若要以完整雙鏈反義基因克隆成百上千的反義基因，所用復制方式為                       。

（3）如果指導番茄合成PG的信使RNA的堿基序列是―A―U―C―C―A―G―G―U―C―，那么，PG反義基因的這段堿基對序列是                                  。

（4）將人工合成的反義基因導入番茄葉肉細胞原生質體的運輸工具是               ，  該目的基因與運輸工具相結合需要使用的酶有                 ，在受體細胞中該基因指導合成的最終產物是                   。

番茄果實成熟過程中，某種酶(PG)開始合成并顯著增加，促使果實變紅變軟。但不利于長途運輸和長期保鮮。科學家利用反義RNA技術(見圖解)，可有效解決此問題。該技術的核心是，從番茄體細胞中獲得指導PG合成的信使RNA，繼而以該信使RNA為模板人工合成反義基因并將之導入離體番茄體細胞，經組織培養獲得完整植株。新植株在果實發育過程中，反義基因經轉錄產生的反義RNA與細胞原有mRNA(靶mRNA)互補形或雙鏈RNA，阻止靶mRNA進一步翻譯形成PG，從而達到抑制果實成熟的目的。請結合圖解回答：

(1)若要將人工合成的完整反義基因克隆出成百上千的反義基因，可用        (寫出中文名稱)技術實現體外快速擴增。

(2)假設PCR反應中的初始只有一個DNA作為模板， n輪循環的產物中含有模板DNA鏈的DNA分子有     個、含有人工合成的DNA引物的DNA分子有    個。若DNA分子中共含900個堿基對，堿基數量滿足：(A+T)／(G+C)=1／2，經5次循環，至少需要向試管中加入     個腺嘌呤脫氧核苷酸(不考慮引物所對應的片段)。

(3)PCR反應中所用到的酶是      ，其具有       的特性。

(4)普通番茄細胞導入目的基因后，先要接種到誘導培養基上培養，脫分化后得到           ，再轉接到分化培養基上，誘導出試管苗，然后進一步培養成正常植株。