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下圖是將人的生長激素基因導人細菌細胞B制造工程菌的示意圖。已知細菌細胞B不含質粒A,也不含質粒A上的基因。質粒A導人細菌細胞B后,其上的基因能得到表達。請回答下列問題

(1)目的基因可通過PCR技術獲取,這一技術中需要的酶是             

(2)將目的基因與質粒結合形成重組質粒的過程中,需要的工具酶有         

(3)若要檢測目的基因是否導人,可在培養細菌B的培養基中加入         (氨卞青霉素/四環素),若在培養基上觀察到大量細菌B的菌落,表明目的基因已成功導  人細菌B,此時所用的培養基屬于            培養基(按用途分)。

(4)若要比較準確地了解轉化率,一般可通過統計菌落的數目來推測活菌數目,還可以通過         的方法統計活菌數目;前者統計的活菌數目比實際的數目       (多/少/一樣),原因是         。為了保證統計數目的準確,還應該設計        

(1)耐高溫的DNA聚合酶

(2)防制性核酸內切酶、DNA連接酶

(3)四環素  選擇

(4)顯微鏡直接計數  少  當兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落  對照實驗


解析:

考查基因工程的操作方法、過程的識圖分析與有關實驗操作的設計評價。(1)基因工程中,獲取目的基因的方法有從基因文庫中獲得、從部分基因文庫中獲得、人工合成法以及用PCR技術擴增目的基因,在PCR技術擴增目的基因是在生物體外的高溫環境下進行的,所以必須耐高溫的DNA聚合酶;

(2)將目的基因與質粒結合構建重組質粒時,必須用相同的限制酶切割目的基因和質粒以獲得相同的粘性末端,同時還必須借助于DNA連接酶,將二者黏合;

(3)由于目的基因的導入,使四環素的抗性基因破壞,因此,重組質粒不在具有康四環素的性狀表達,只有康氨芐青霉素的性狀作為標記性狀,加入氨芐青霉素的培養基具有選擇作用,因此屬于選擇性培養基;

(4)除應用活菌落計數外,還可借助血細胞計數板用顯微鏡直接計數,活細胞計數法獲得的細菌數目比顯微鏡直接計數法獲得數目少,因為顯微鏡下計數的的細菌數目既有活細菌、又有死細菌,因此,為保證計數準確,必須設置對照試驗,以減少實驗誤差。

練習冊系列答案
相關習題

科目:高中生物 來源: 題型:

下圖是將人的生長激素基因導入細菌B細胞內制造“工程菌”的示意圖。已知細菌B細胞內不含質粒A,也不含質粒A上的基因。判斷下列說法正確的是              (    )

A.將重組質粒導入細菌B常用的方法是顯微注射法

B.將完成導入過程后的細菌涂布在含有氨芐青霉素的培養基上,能生長的只是導入了重組質粒的細菌

C.將完成導入過程后的細菌涂布在含有四環素的培養基上,能生長的就是導入了質粒A的細菌

D.目的基因成功表達的標志是受體細胞能在含有氨芐青霉素的培養基上生長

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科目:高中生物 來源:2013屆湖北武漢五校高二下學期期中統考生物試卷(解析版) 題型:選擇題

下圖是將人的生長激素基因導入細菌B細胞內制備“工程菌”的示意圖。已知細菌B細胞內不含質粒A,也不含質粒A上的基因。判斷下列說法不正確的是

A.要將重組質粒導入細菌B首先要把細菌細胞處理為感受態細胞

B.將完成導入過程后的細菌涂布在含有四環素的培養基上,能生長的細菌必定是導入了重組質粒的細菌

C.將完成導入過程后的細菌涂布在含有氨芐青霉素的培養基上,導入了重組質粒的細菌必定能生長

D.“工程菌” 制備成功的標志是 “工程菌”能合成出人的生長激素

 

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科目:高中生物 來源:2011-2012學年天津市高三入學摸底考試 生物試卷 題型:選擇題

下圖是將人的生長激素基因導入細菌B細胞內制造“工程菌”的示意圖。已知細菌B細胞內不含質粒A,也不含質粒A上的基因。判斷下列說法正確的是            (    )

A.將重組質粒導入細菌,細菌涂布在含有四環素的培養基上能生長

B常用的方法是顯微注射法,將完成導入過程后的細菌涂布在含有氨芐青霉素的培養基上,能生長的只是導入了重組質粒的細菌?

C.將完成導入過程后的細菌涂布在含有四環素的培養基上,能生長的就是只導入了質粒A的細菌?

D.目的基因成功表達的標志是受體細胞能在含有氨芐青霉素的培養基上生長

 

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科目:高中生物 來源:2010年安徽省高二下學期期中考試生物卷 題型:綜合題

下圖是將人的生長激素基因導入細菌B細胞內制造“工程菌”示意圖,所用載體為質粒A.已知細菌B細胞內不含質粒A,也不含質粒A上的基因,質粒A導入細菌B后,其上的基因能得到表達.

(1)圖中質粒A與目的基因結合產生重組質粒的過程通常是在體外完成的,此過程必須用到的工具酶為____________。

(2)在導入完成后得到的細菌,實際上有的根本沒有導入質粒,所以在基因工程的操作步驟中必須要有________________這一步驟.

(3)若將重組質粒導入細菌后,目的基因在“工程菌”中表達成功的標志是____________________。

 

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