Question

(11分)．日本下村修、美國沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白(GFP)等方面的突出貢獻，獲得2008年度諾貝爾化學獎。下圖為我國首例綠色熒光蛋白(GFP)轉基因克隆豬的培育過程示意圖。據圖回答：

(1)綠色熒光蛋白基因在該實驗中是作為________基因。獲取綠色熒光蛋白基因常用的三種方法是____________­­__________________________。

圖中通過過程①、②形成重組質粒，需要限制性核酸內切酶切取目的基因、切割質粒。限制性核酸內切酶I的識別序列和切點是—G^↓GATCC—，請畫出質粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端：____________________________________。

(2)過程③將重組質粒導入豬胎兒成纖維細胞時，采用最多也最有效的方法是________________________________。

(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上，GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因，其作用是______________________________。

(4)目前科學家們通過蛋白質工程制造出了藍色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等，采用蛋白質工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是(用數字表示)________________。

①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計序列

③藍色熒光蛋白基因的修飾(合成)

④表達出藍色熒光蛋白

(5)在培養重組細胞時，培養液中通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和________等。

(6)以上培育過程中應用到的生物技術有__________________等。(至少答出三項)                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                             

 

Answer 1

【答案】

⑴目的 

從基因文庫中獲取目的基因、人工合成、利用PCR技術擴增目的基因（答全得2分）

 （2分）

(2)顯微注射技術　(3)為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因　(4)②①③④　

(5)血清、血漿　

(6)轉基因技術、核移植技術、動物細胞培養技術、胚胎移植技術(至少答出三項)（2分）

【解析】由圖可知綠色熒光蛋白基因是目的基因。獲取目的基因方法：從基因文庫中獲取目的基因、人工合成、利用PCR技術擴增目的基因。動物轉基因一般采用顯微注射技術，重組質粒中目的基因的作用為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因。