回答下列有關基因工程和酶工程的有關問題（9分）
下圖所示為利用現代生物技術獲得能表達某蛋白酶工程菌的過程。
選用質粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶切割位點。請回答：
59．構建含目的基因的重組質粒A時，應選用限制酶 ，對 進行切割。再用 進行重組。
60．圖中質粒同時用PstⅠ和ApaⅠ酶切，產生1800對堿基和8200對堿基的兩種片段，如用以上四種酶同時切割此質粒，則產生600對堿基和8200對的堿基兩種片段，那么用同時用PstⅠ和EcoRⅠ酶切，則產生的片段有 。
61．篩選后所得到的工程菌增值后表達出大量此蛋白酶，但此蛋白酶不會分泌到細胞外，因此還需要利用酶工程中的 技術獲得此蛋白酶，
62．獲得此蛋白酶后，利用酶的固定化技術能回收和重復利用此蛋白酶，以下屬于固定化技術中的載體結合法的是（ ）
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科目：高中生物 來源：2011年普通高等學校招生全國統一考試生物卷（上海） 題型：綜合題
回答下列有關基因工程的問題。
(1)基因工程中使用的限制酶，其特點是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
下圖四種質粒含有E1和E2兩種限制酶的識別，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四環素的抗性基因。
(2)將兩端用E1切開的Tcr基因與用E1切開的質粒X－1混合連接，連接后獲得的質粒類型有＿＿＿＿＿＿＿＿＿。（可多選）
| A．X－1 |
| B．X－2 |
| C．X－3 |
| D．X－4 |
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科目：高中生物 來源：2010年福建省泉州第第七中學高二下學期期中考試生物卷 題型：綜合題
（11分）回答下列有關基因工程的相關問題
（1）“分子手術刀”是指：＿＿＿＿＿，其來源主要是從＿＿＿＿＿生物中分離純化出來的，其切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式：＿＿＿＿＿末端和＿＿＿＿＿末端
（2）“分子縫合針”是指：＿＿＿＿＿，催化形成的是兩個核苷酸之間的＿＿＿＿＿鍵。
（3）“分子運輸車”是指載體，最常用的載體是＿＿＿＿＿,它是一種裸露的、結構簡單的、獨立于細菌擬核DNA之外，并具有自我復制能力的雙鏈環狀DNA分子。
（4）基因工程的基本操作程序：
第一步：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿；第二步：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿；第三步：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿；第四步：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
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科目：高中生物 來源：2011-2012學年浙江省十二校新高考研究聯盟高三第一次聯考生物試卷 題型：綜合題
回答下列有關基因工程和細胞工程、胚胎工程的問題：
（1）在基因工程的具體操作中，源自不同生物的DNA之所以能夠重組的原因是：
▲ ；相同的基因在不同的生物體內，都能成功表達出相同的產物，其原因是： ▲ 。
（2）在基因工程中，使用標記基因的目的是： ▲ ；基因工程最終獲得成功的標志是： ▲ 。
（3）在植物組織培養的再分化過程中，若要將愈傷組織誘導出根，則植物生長調節劑的濃度配比應為：生長素濃度 ▲ 細胞分裂素濃度（填“大于”、“小于”或“等于”）。
（4）動物細胞克�。ǹ寺∨囵B法）要取得成功的最基本要求是 ▲ 。為提高克隆形成率，還應該在培養基中加入 ▲ 以支持生長。同時，使用CO2培養箱用于 ▲ 。
（5）在胚胎工程中，若要獲得多個卵細胞，則需對母畜作 ▲ 處理，若要出現“不同的母親產下完全相同的后代”這一現象，則使用的技術為 ▲ 。
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科目：高中生物 來源：2011-2012學年寧夏高三上學期第一次月考（理綜）生物試卷 題型：綜合題
【生物——選修3現代生物科技專題】（15分）
請回答下列有關基因工程的問題：
（1）如果用某種生物發育的某個時期的mRNA反轉錄產生的 片段，與載體連接后儲存在一個受體菌群中，這個受體菌群體就叫做這種生物的 。
（2）一個基因表達載體的組成，除了目的基因外，還必須有 ， 以及 。
（3）目的基因進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持穩定和表達的過程，稱為 。將目的基因導入植物細胞采用最多的方法是 法。轉基因動物中采用最多，也是最為有效的一種將目的基因導入動物細胞的方法是 。大腸桿菌最常用的轉化方法是：首先用 處理細胞，使細胞處于一種 的生理狀態，這種狀態的細胞被稱作感受態細胞。然后將重組表達載體DNA溶于緩沖液中與感受態細胞混合，在一定的溫度條件下促進 ，完成轉化過程。
（4）目的基因導入受體細胞后，是否可以穩定維持和表達其遺傳特性，只有通過檢測與鑒定才能知道。首先，要檢測轉基因生物 上是否插入了目的基因。其次，還需要檢測目的基因是否 。最后檢測目的基因是否 。
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科目：高中生物 來源：2011年普通高等學校招生全國統一考試生物卷（上海） 題型：綜合題
回答下列有關基因工程的問題。
(1)基因工程中使用的限制酶，其特點是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
下圖四種質粒含有E1和E2兩種限制酶的識別，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四環素的抗性基因。
(2)將兩端用E1切開的Tcr基因與用E1切開的質粒X－1混合連接，連接后獲得的質粒類型有＿＿＿＿＿＿＿＿＿。（可多選）
A．X－1
B．X－2
C．X－3
D．X－4
(3)若將上圖所示X－1、X－2、X－3、X－4四種質粒導入大腸桿菌，然后分別涂布在含有青霉素或四環素的兩種培養基上。在這兩種培養上均不能生長的大腸桿菌細胞類型有＿＿＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
(4)如果X－1用E1酶切，產生850對堿基和3550對堿基兩種片段：那么質粒X－2（Tcr基因的長度為1200對堿基）用E2酶切后的片段長度為＿＿＿＿＿＿＿＿＿對堿基。
(5)若將外源的Tcr基因兩端用E2切開，再與用E2切開的X－1混合連接，并導入大腸桿菌細胞，結果顯示，含X－4的細胞數與含X－1的細胞數之比為13，增大DNA連接酶用量能否提高上述比值？＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
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