Question

回答基因工程的有關問題：(共9分)
（1）構建基因工程表達載體時，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產生黏性末端，也可能產生_____末端。若要在限制酶切割目的基因和質粒后使其直接進行連接，則應選擇能使二者產生_____（相同，不同）黏性末端的限制酶。
（2）利用大腸桿菌生產人胰島素時，構建的表達載體含有人胰島素基因等，其中RNA聚合酶識別和結合的部位是_____。在用表達載體轉化大腸桿菌時，常用_____處理大腸桿菌，以利于表達載體進入。為了檢測胰島素基因是否轉錄出了mRNA，可用放射性同位素標記的______ 作探針與mRNA雜交，該雜交技術稱為______。為了檢測胰島素基因轉錄的mRNA是否翻譯成胰島素，常用______          技術。
(3)如果要將某目的基因通過農桿菌轉化法導入植物細胞，先要將目的基因插入農桿菌Ti質粒的_____中，然后用該農桿菌感染植物細胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細胞的______上。

Answer 1

（1）平   相同（2）啟動子    Ca²⁺    目的基因（或胰島素基因）   分子雜交技術  抗原-----抗體雜交（3）T—DNA    染色體DNA

解析試題分析：用限制酶切割DNA后，可能產生黏性末端，也可能產生平口末端。若要在限制酶基因工程中，往往采用同種限制酶切割目的基因和質粒以產生相同的黏性末端，再用DNA連接酶使其直接進行連接。RNA聚合酶識別和結合的部位是啟動子。在用表達載體轉化大腸桿菌時，常用Ca²⁺處理大腸桿菌，使其成為感受態細胞，以利于表達載體進入。為了檢測胰島素基因是否轉錄出了mRNA，可采用分子雜交技術，即用放射性同位素標記的胰島素基因作探針與mRNA雜交；了檢測胰島素基因轉錄的mRNA是否翻譯成胰島素，可采抗原-----抗體雜交技術。如果要將某目的基因通過農桿菌轉化法導入植物細胞，先要將目的基因插入農桿菌Ti質粒的T—DNA中，然后用該農桿菌感染植物細胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細胞的染色體DNA上。
考點：本題考查基因工程的相關內容。
點評：本題意在考查考生的識記能力，屬于容易題。