Question

【題目】人α1－抗胰蛋白酶（AAT）是一種重要的藥用蛋白，對胰島B細胞有免疫保護作用，AAT可通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)在羊乳中獲得。流程如下：

（1）將重組表達載體導(dǎo)入受體細胞中，常選用受精卵作為受體細胞的原因是__________________。

（2）胚胎移植前對代孕母羊進行____________處理，目的是________________________________。胚胎發(fā)育到囊胚期，可從_____________分離出胚胎干細胞；為了維持胚胎干細胞不分化的狀態(tài)，在體外培養(yǎng)時應(yīng)_________________________________；若要鑒定胚胎的性別，具體的操作是______________________________________________。

（3）檢測羊乳中是否含有AAT的技術(shù)手段是_______________。

Answer 1

【答案】受精卵具有發(fā)育的全能性同期發(fā)情處理使供體和受體具有相同的生理特征內(nèi)細胞團放在飼養(yǎng)層細胞上培養(yǎng)(在培養(yǎng)液中添加抑制分化因子)取滋養(yǎng)層細胞進行DNA分子性別鑒定抗原－抗體雜交

【解析】

圖示是轉(zhuǎn)AAT基因母羊的培育流程，其中涉及基因工程、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎干細胞的獲取和胚胎移植等技術(shù)的應(yīng)用。其中基因工程的受體細胞之所以選擇受精卵，主要是因為動物體細胞的全能性受到限制，而受精卵具有全能性最高，且細胞大、易操作等優(yōu)點。在早期胚胎培養(yǎng)過程中若要獲得胚胎干細胞，可以從培養(yǎng)的囊胚中內(nèi)細胞團獲取；若要進行胚胎的性別鑒定，常常取滋養(yǎng)層細胞進行DNA鑒定；在胚胎移植中，需要對接受胚胎的受體母羊進行同期發(fā)情處理，使其供體和受體具有相同的生理特征，而易于接受胚胎。最后在檢測AAT是否存在時，通常采用抗原-抗體雜交技術(shù)。

（1）為培育轉(zhuǎn)基因動物，常選用受精卵作為目的基因的受體細胞，是因為受精卵大，易于操作且具有發(fā)育的全能性。

（2）為了使供體和受體具有相同的生理特征，胚胎移植前對代孕母羊要進行同期發(fā)情處理。胚胎發(fā)育到囊胚期，可從囊胚內(nèi)的內(nèi)細胞團分離出胚胎干細胞；為了維持胚胎干細胞不分化的狀態(tài)，在體外培養(yǎng)時應(yīng)放在飼養(yǎng)層細胞上培養(yǎng)或者在培養(yǎng)液中添加抑制分化因子；若要鑒定胚胎的性別，應(yīng)取滋養(yǎng)層細胞進行DNA分子性別鑒定，因為滋養(yǎng)層細胞與內(nèi)細胞團的細胞都是同一個受精卵分裂分化來的，遺傳物質(zhì)一般相同。

（3）檢測羊乳中是否含有AAT的原理是把AAT當(dāng)作抗原，在分泌的羊乳中加入特定的抗體，觀察是否會出現(xiàn)抗原-抗體的結(jié)合反應(yīng)。若出現(xiàn)，說明羊乳中含有AAT，反之，則沒有；這種技術(shù)手段稱為抗原-抗體雜交技術(shù)。