Question

圖甲乙中的箭頭表示三種限制性核酸內切酶的酶切位點，Amp^r表示氨芐青霉素抗性基因，Ne ^r表示新霉素抗性基因。下列敘述正確的是（  ）

A．圖甲中的質粒用BamHⅠ切割后，含有4個游離的磷酸基團

B．在構建重組質粒時，可用PstⅠ和BamHⅠ切割質粒和外源DNA

C．用PstⅠ和Hind III酶切，加入DNA連接酶后可得到1種符合要求的重組質粒

D．導入目的基因的大腸桿菌可在含氨芐青霉素的培養基中生長

Answer 1

C

解析試題分析：質粒呈環狀，用BamHⅠ切割后，得到的片段含有2個游離的磷酸基團；BamHⅠ切割外源DNA會將目的基因破壞，所以不能選用該限制酶切割；PstⅠ和Hind III雙酶切，防止目的基因和質粒的任意拼接，加入DNA連接酶后只能得到1種符合要求的重組質粒；由于PstⅠ破壞了Amp^r，所以重組質粒不能在含氨芐青霉素的培養基中生長。
考點：本題考查限制酶以及構成基因表達載體的知識。
點評：本題難度中等，要求學生理解DNA中游離磷酸基團的位置以及雙酶切的含義。