Question

研究表明，廣泛存在于植物細胞中的原花青素有較強的抗癌作用。下面是有關的研究實驗：

實驗一  為研究原花青素對人類肝癌細胞的作用，將實驗室培養的人肝癌細胞制成單細胞懸液，分別加入不同濃度的原花青素溶液。48小時后，檢測處于細胞周期不同時期的細胞數量，得到的數據如下表。請回答問題。

（1）細胞培養箱中應含有5%的CO₂，目的是____    與細胞貼壁生長達到70%時，要用____處理后分瓶進行傳代培養，這是為了避免              。

（2）癌細胞的最主要特征是____。表中數據顯示，隨著加入原花青素濃度的增加，    期細胞的比例逐漸增加，      期明顯減少，    期減少至基本消失。表明原花青素能            。

實驗二  原花青素的抗癌作用還表現在還能清除生物體內的亞硝酸鹽。為了探究葡萄籽中提取的原花青素溶液清除亞硝酸鹽的最適濃度，請完善以下實驗設計。

實驗材料：提取劑、原花青素提取液、0．4%對氨基苯磺酸溶液（顯色劑1）、0．2%的N-l-萘基乙二胺鹽酸鹽溶液（顯色劑2）、5 μg/mL的亞硝酸鈉溶液、分光光度計等其他必需器材。

實驗原理：①亞硝酸鈉與顯色劑l和2反應生成    色產物，用分光光度計測出反應后溶液的吸光度A₀。向亞硝酸鈉液中加入原花青素提取液后再進行上述反應，測定吸光度A、。則亞硝酸鹽的清除率可以按下式計算：清除率=（A₀—A_x）／A₀×l00%。

 ②比較        ，得出原花青素溶液清除亞硝酸鹽的最適濃度。

實驗步驟：

 ①取6支25ml的比色管，編號為1～6號。

 ②向l號管中加入0．5ml亞硝酸鈉溶液和l0ml不含原花青紊的提取劑，再依次加入顯色劑1和2，用蒸餾水稀釋至刻度，靜置一段時間后，用分光光度計測550nm處吸光度并記錄。

③____                        。

④計算不同濃度原花青素溶液對豫硝酸鹽的清除率，比較并得出結論。

 

Answer 1

【答案】

實驗一

（1）維持培養液的pH  胰蛋白酶  接觸抑制

（2）能無限增殖  G1  S  G2/M  抑制人肝癌細胞的增殖，使其停留在G1期

實驗二

實驗原理：①玫瑰紅  ②不同濃度的原花青素溶液對豫硝酸鹽的清除率

實驗步驟：③向2~6號管中加入0．5ml亞硝酸鈉溶液和l0ml不同濃度的原花青紊的提取劑，其余步驟同②

【解析】

試題分析： (1)細胞培養過程中通入5%的CO2，H₂O+CO₂=H⁺+HCO3^-,維持培養液中的pH，與細胞貼壁生長達到70%時，要用胰蛋白酶處理后分瓶進行傳代培養，這是為了避免細胞接觸抑制；（2）癌細胞具有無限增殖、細胞形態結構發生顯著性變化，細胞表面糖蛋白減少，黏著性降低，容易在體內分散和轉移等特點，最主要特征是惡性增殖；隨著加入原花青素濃度的增加，G1期細胞的比例逐漸增加，S期明顯減少，G2/M期減少至基本消失。表明原花青素能抑制癌細胞增殖，使其停在G1期。①要測出不加花青素是的OA值，作為對照，然后比較不同濃度花青素溶液對亞硝酸鹽作用后的OA值，計算清除效率，得出最適濃度。

考點：本題考查動物細胞培養、細胞癌變等相關知識，意在考查學生能理解所學知識的要點，具有對一些生物學問題進行初步探究的能力。