Question

13．如圖為利用轉基因水稻大規模生產重組人血清白蛋白生產流程，圖中tet^R表示四環素抗性基因，amp^R表示氨芐青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ為三種限制酶．下列相關分析中正確的是（　　）

• A． 基因工程的核心步驟是圖中③
• B． 在培養基中應加入四環素篩選到含重組質粒的土壤農桿菌
• C． 用HindⅢ、BamHⅠ雙酶切的目的是保證人血清白蛋白基因和質粒的定向連接
• D． 檢測水稻胚乳細胞是否含有目的基因及其是否成功轉錄的方法都是DNA分子雜交法

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：A、基因工程的核心步驟是圖中②基因表達載體的構建，A錯誤；
B、當人血清白蛋白基因和質粒連接成重組質粒后，tet^R基因被人乳鐵蛋白基因隔開，不是完整的，而amp^R基因是完整的，所以篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要含氨芐青霉素的培養基上進行，B錯誤；
C、外源DNA分子上含有限制酶BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ的切割位點，其中限制酶SmaⅠ的切割位點位于目的基因上，所以獲取目的基因和構建基因表達載體時，應用限制酶HindⅢ和BamHⅠ，并且能保證人血清白蛋白基因和質粒的定向連接，防止自身環化，C正確；
D、檢測水稻胚乳細胞是否含有目的基因用DNA分子雜交法，檢測其是否成功轉錄的方法是分子雜交法，D錯誤．
故選：C．

點評 本題難度適中，屬于考綱中識記、理解層次的要求，著重考查了基因工程的步驟、目的基因導入植物細胞的方法等相關知識，要求考生具有一定的識圖能力，并能識記相關基礎知識．