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生物柴油是一種可再生的清潔能源，其應用在一定程度上能夠減緩人類對化石燃料的消耗，科學家發現，在微生物M產生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇反應能夠合成生物柴油（如下圖）。（每空2分）

（1）用于生產生物柴油的植物油不易發揮，宜選用_________________、________________方法從油料作物中提取。

（2）篩選產脂肪酶的微生物M時，選擇培養基中的添加的植物油為微生物生長提供__________，培養基滅菌采用的最適方法是______________法。

（3）測定培養液中微生物數量，可選用_____________法直接計數；從微生物M分離提取的脂肪酶通常需要檢測_______________，以確定其應用價值；為降低生物柴油生產技術，可利用____________________技術使脂肪酶能夠重復使用。

（4）若需克隆脂肪酶基因，可應用耐熱DNA聚合酶催化的___________________技術。

【答案】

（1）壓榨；萃取（注：兩空順序無先后）

（2）碳源高壓蒸汽滅菌

（3）顯微鏡直接計數酶活性（或：酶活力）

固定化酶（或：固定化細胞）

（4）PCR（或：多聚鏈式反應，聚合酶鏈式反應）

【解析】略

練習冊系列答案

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科目：高中生物 來源： 題型：

【生物—生物技術實踐】

生物柴油是一種可再生的清潔能源，其應用在一定程度上能夠減緩人類對化石燃料的消耗，科學家發現，在微生物M產生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇反應能夠合成生物柴油（如下圖）。

（1）用于生產生物柴油的植物油不易發揮，宜選用_____、_____方法從油料作物中提取。

（2）篩選產脂肪酶的微生物M時，選擇培養基中的添加的植物油為微生物生長提供____，培養基滅菌采用的最適方法是____法。

（3）測定培養液中微生物數量，可選用_____法直接計數；從微生物M分離提取的脂肪酶通常需要檢測______，以確定其應用價值；為降低生物柴油生產技術，可利用______技術使脂肪酶能夠重復使用。

（4）若需克隆脂肪酶基因，可應用耐熱DNA聚合酶催化的_____技術。

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科目：高中生物 來源：2012-2013學年上海市普陀區高三第一學期質量調研生物試卷（一模）（解析版） 題型：綜合題

生物柴油是一種可再生的清潔能源，其應用在一定程度上能夠減緩人類對化石燃料的消耗，科學家發現，在微生物M（單細胞）產生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇反應能夠合成生物柴油（如下圖1）。

1、篩選產脂肪酶的微生物M時，選擇培養基中添加的植物油為微生物生長提供，培養基滅菌采用的最適方法是法。

2、圖2是采用純化微生物M培養的兩種接種方法接種后培養的效果圖。則獲得圖A效果的接種方法是，圖B效果的接種方法是。

3、若需人工大量克隆脂肪酶基因，可應用___ _技術，該過程需要的特殊酶是。

4、常用血球計數板（規格為1mm×1mm×0.1mm）分兩類，一類是每個計數室包括16個中格，每個中格包括25個小格，這種計數板抽樣計數時只要統計四個頂角的中格即可；另一類是是每個計數室包括25個中格，每個中格包括16個小格，這種計數板抽樣計數時除了統計四個頂角的中格外還要計數中央的一個中格。在實驗中如需定期測定培養液中微生物M的細胞數量，則在取出的樣液中要立即加入固定液，其目的是。如果將樣液稀釋100倍，采用血球計數板計數時，觀察到的計數室中細胞分布如圖2所示，則培養液中微生物M的細胞密度為個/L.

5、研究人員擬將某目的基因導入微生物M 細胞中，為此需要選擇合適的質粒作為運載體。下圖所示X－1、X－2、X－3、X－4為四種相關質粒，其中Tc^r表示抗四環素的抗性基因，Ap^r表示青霉素抗性基因，E1和E2表示兩種限制酶的識別位點。基因工程中限制酶作用的化學鍵是。若將這四種質粒分別導入微生物M，然后將微生物M菌液分別涂布在含有青霉素或四環素的兩種培養基上培養。則在這兩種培養基上均不能生長的M細胞類型有________________。