Question

19．回答下列有關遺傳信息傳遞與表達的問題．

如圖A所示，質粒pZHZ9上含有X抗生素抗性基因（X^R）和Y抗生素抗性基因（Y^R）．其中X^R內部含有限制酶KasⅠ識別序列，Y^R內部含有限制酶FseⅠ、HpaⅡ、NaeⅠ、NgoMⅣ識別序列，五種酶的識別序列如圖B（▼表示切割位點），且這些識別序列在整個質粒上均僅有一處，目的基因內部不存在這些識別序列．
（1）若要將結構如圖C所示的目的基因直接插入到Y^R內形成重組質粒pZHZ10，則pZHZ9需用限制酶NgoMIV切開．
（2）將上述切開的質粒溶液與目的基因溶液混合，加入DNA連接酶連接后，進行大腸桿菌受體細胞導入操作．之后，受體細胞的類型（對兩種抗生素表現出抗性R或敏感性S）包含ABD（多選）．
A．X^R、Y^R B．X^R、Y^S  C．X^S、Y^RD．X^S、Y^S
（3）若用KasⅠ和FseⅠ聯合酶切重組質粒pZHZ10（只含單個目的基因），則可能產生的酶切片段數為ABC（多選）．
A． 1  B．2  C．3  D．4
（4）動物基因工程通常以受精卵作為受體細胞的根本原因是B．
A．受精卵能使目的基因高效表達      B．受精卵可發育成動物個體
C．受精卵基因組更易接受DNA的插入   D．受精卵尺寸較大，便于DNA導入操作．

Answer 1

分析 分析題圖：圖A為質粒pZHZ9，其上含有X抗生素抗性基因（X^R）和Y抗生素抗性基因（Y^R），其中X^R內部含有限制酶KasⅠ識別序列，Y^R內部含有限制酶FseⅠ、HpaⅡ、NaeⅠ、NgoMⅣ識別序列，五種酶的識別序列在整個質粒上均僅有一處，目的基因內部不存在這些識別序列．限制酶NgoMIV切割DNA分子后露出的黏性末端與目的基因兩端的黏性末端相同．

解答 解：（1）比較五種限制酶的識別位點和露出的黏性末端，可以看出只有限制酶NgoMIV切割DNA分子后露出的黏性末端與目的基因兩端的黏性末端相同．因此，要將結構如圖C所示的目的基因直接插入到Y^R內形成重組質粒pZHZ10，則pZHZ9需用限制酶NgoMIV切開．
（2）將圖中切開的質粒與目的基因溶液混合，加入DNA連接酶連接后，可能有以下三種情況：
①質粒自身環化或質粒與質粒結合，將它們導入受體細胞后，由于X^R、Y^R基因都沒有被破壞，因此表現為X^R、Y^R，A正確；
②有的質粒與目的基因連接形成重組質粒，這種重組質粒導入受體細胞后，由于Y^R基因被破壞，只有X^R抗性，表現為X^R、Y^S，B正確；
③目的基因自身環化或目的基因與目的基因結合，將它們導入受體細胞后，由于沒有抗性基因，因此表現為X^S、Y^S，D正確．
故選：ABD．
（3）根據題意，X^R內部含有限制酶KasⅠ識別序列，Y^R內部含有限制酶FseⅠ、HpaⅡ、NaeⅠ、NgoMⅣ識別序列，五種酶的識別序列在整個質粒上均僅有一處，目的基因內部不存在這些識別序列．如果插入目的基因后，NgoMⅣ識別序列有兩處，根據題意，能夠被NgoMⅣ識別的序列都能被FseⅠ識別，因此用KasⅠ和FseⅠ聯合酶切重組質粒pZHZ10，最少可以切開一個位點，得到一種DNA片段，最多切開3個位點，得到三種DNA片段．故選ABC．
（5）動物體細胞的全能性受到限制，不能表現出來，而受精卵的全能性最高，因此轉基因動物一般用受精卵作為受體細胞．故選：B．
故答案為：
（1）NgoMIV
（2）ABD
（3）ABC
（4）B

點評 本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節；能結合圖中和題中信息準確答題，有一定難度，屬于考綱理解和應用層次的考查．