Question

【題目】為檢測消毒前后牛奶中細菌含量變化情況，做如圖1操作。用無菌吸管從三角燒瓶中吸取1mL生牛奶稀釋液至盛有9mL無菌水的試管中，如此重復3次，將10mL生牛奶稀釋到10﹣4濃度后，取0.1mL滴在培養基上．

（1）牛奶在飲用前都要經過巴氏消毒，以殺死有害微生物。巴氏消毒的方法是__。

（2）將牛奶稀釋液滴加在培養基上進行涂布，應選擇如圖2所示的涂布工具是__。

該涂布工具最合適的滅菌方法是__。

A．火焰灼燒 B．高溫高壓滅菌 C．酒精擦拭 D．紫外線照射

（3）消毒后牛奶中絕大部分細菌被殺死，若用稀釋培養法檢測消毒后牛奶是否含有細菌，則在操作步驟上應作什么改動？__。

（4）從生牛奶取樣培養得到的菌落中，混有各種雜菌，從中檢測出大腸桿菌的方法是，在培養基中加入__，具有__特征可以鑒別大腸桿菌。

Answer 1

【答案】70﹣75℃煮30分鐘（80℃煮15分鐘） B B 稀釋次數減少 伊紅美藍 （金屬光澤的紫）黑色

【解析】

圖1為稀釋涂布平板法，圖2中A為接種環，B為涂布器，C為滴管，D為接種針。

滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，適用對象主要有接種環、接種針、玻璃器皿、培養基等。消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部的部分微生物（不包芽孢和孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法，適用對象主要有操作空間、某些液體、雙手等。稀釋涂布平板法常用來進行微生物的計數。

（1）常用的消毒方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法。巴氏消毒的方法是指70﹣75℃煮30分鐘或80℃煮15分鐘，使用這種方法對生鮮牛奶進行消毒的好處是牛奶的營養成分不被破壞。

（2）將液體菌種接種在固體培養基上常用的方法主要是稀釋涂布平板法，所用的接種工具是涂布器。即圖2中的B。為防止雜菌污染，該工具應浸泡于酒精中，涂布前應將涂布器引燃（灼燒）后待冷卻。

（3）消毒后的牛奶中絕大部分細菌被殺死，若繼續用該方法檢測消毒后的牛奶中細菌的數量，由于細菌數目減少，故應稀釋次數減少。

（4）檢測大腸桿菌的方法是在培養基中加人伊紅美藍，菌落具有（金屬光澤的紫）黑色特征的可以認定為大腸桿菌。