Question

12．對于不同的生物，將重組基因導入受體細胞的方法有差異，下列方法不合適的是（　　）

• A． 以質粒為載體，利用大腸桿菌生產人的胰島素時，可用氯化鈣處理大腸桿菌
• B． 以噬菌體為載體，利用大腸桿菌生產人的凝血因子時，可使其直接侵染大腸桿菌
• C． 以質粒為載體，利用轉基因羊生產人的乳鐵蛋白時，可用顯微注射技術將重組基因導入受精卵
• D． 以質粒為載體，培育轉基因植物時，可借鑒質粒侵染細胞的途徑，用重組質粒侵染植物細胞

Answer 1

分析 1、基因工程的工具：
（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵．
（3）運載體：常用的運載體：質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒．
2、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：A、以質粒為載體，利用大腸桿菌生產人的胰島素時，可用氯化鈣處理大腸桿菌，使之成為感受態，A正確；
B、以噬菌體為載體，利用大腸桿菌生產人的凝血因子時，可使其直接侵染大腸桿菌，DNA分子進入細菌體內，B正確；
C、以質粒為載體，利用轉基因羊生產人的乳鐵蛋白時，可用顯微注射技術將重組基因導入羊的受精卵，并進行早期胚胎培養和胚胎移植，C正確；
D、以質粒為載體，培育轉基因植物時，常用農桿菌轉化法，D錯誤．
故選：D．

點評 本題考查基因工程的工具和步驟，意在考查學生的識記和理解能力，解題的關鍵是掌握相關知識．