Question

【選修1：生物技術實踐】
（1）PCR是一種DNA體外擴增技術．1988年，PCR儀問世，并被廣泛應用于基因擴增和DNA序列測定．如圖是PCR技術示意圖，請回答下列問題：
①標準的PCR過程一般分為

 

、

 

、

 

三大步驟．
②引物是此過程中必須加入的物質，從化學本質上說，引物是一小段

 

．
③將雙鏈DNA

 

，使之變性，從而導致

 

．
④引物延伸需提供

 

作為原料．
（2）紅細胞含有大量血紅蛋白，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行實驗，來提取和分離血紅蛋白，血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步：樣品處理、粗分離  純化  純度鑒定．請回答下列有關問題：
①樣品處理，它包括

 

、

 

、收集血紅蛋白溶液．
②收集的血紅蛋白溶液在透析袋中經過透析，這就是樣品的粗分離．透析的目的是

 

．透析的原理是

 

．
③通過凝膠色譜法將樣品進一步純化，最后經SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定．樣品純化的目的是

 

．

Answer 1

考點：PCR技術的基本操作和應用,蛋白質的提取和分離

專題：

分析：本題是對PCR體外擴增DNA片段的原理、過程和條件及血紅蛋白的提取和分離過程中的實驗原理和操作程序的考查，回憶PCR體外擴增DNA片段的原理、過程和條件及血紅蛋白的提取和分離過程中的實驗原理和操作程序，然后結合問題的具體要求進行解答．

解答： 解：（1）①PCR是一種DNA體外擴增技術一個循環包括變性、復性和延伸三步．
②PCR技術中的引物實質是單鏈DNA片段或RNA片段．
③PCR技術中，DNA雙螺旋結構的打開的原理是利用DNA分子熱變性的原理，通過控制溫度控制DNA分子的解聚和結合，當溫度在95℃時，DNA分子變性，雙螺旋結構打開形成兩條單鏈．
④引物延伸即合成DNA分子需要四種游離的脫氧核糖核苷酸為原料．
（2）①血紅蛋白提取和分離過程中樣品處理包括紅細胞的洗滌、血紅蛋白的釋放和收集血紅蛋白溶液．
②粗分離過程是指將收集的血紅蛋白溶液在透析袋中經過透析的過程，原理是透析袋能使小分子自由進出，而大分子則保留在透析袋內，經過透析，將分子量小的雜質除去．
③通過凝膠色譜法將樣品進一步純化的目的是除去相對分子質量大的雜質蛋白．
故答案為：
①變性    復性    延伸      ②單鏈DNA或RNA   ③加熱到95℃雙鏈DNA分離成兩條單鏈    ④四種脫氧核苷酸
（2）①紅細胞的洗滌      血紅蛋白的釋放
②去除相對分子質量較小的雜質     透析袋能使小分子自由進出，而大分子則保留在透析袋內
③通過凝膠色譜法將相對分子質量大的雜質蛋白除去

點評：對PCR體外擴增DNA片段的原理、過程和條件及血紅蛋白的提取和分離過程中的實驗原理和操作程序的記憶和掌握是本題考查的重點．