Question

【題目】臨床實驗表明，服用乳酸菌及其制品具有減少人體血清膽固醇含量、降低心腦血管發病率的功效。下面是從酸奶中篩選出高效降低膽固醇的乳酸菌的實驗，請回答下列問題：

（1）甲、乙兩位同學為測定某一酸奶樣品中微生物的數量，在同一稀釋倍數下得到以下結果：

實驗者	平板菌落數
	A	B	C	D
甲同學	110	140	149	133
乙同學	27	169	176	124

兩位同學的計數結果中，______同學的結果可信度低，其原因是_________________。

（2）為獲取純種乳酸菌，將少量酸奶制成梯度稀釋液，將其中稀釋到的稀釋液涂布于添加了碳酸鈣的乳酸菌培養基（MRS培養基）平板上，在_____（填“有氧”或“無氧”）條件下37℃恒溫培養72h。挑取有_______的菌落，用_______法接種在MRS斜面培養基上保藏備用。

（3）為獲得能高效降低膽固醇的乳酸菌菌株，在普通的MRS液體培養基中添加適量_________并用超聲波振蕩乳化20min，調pH至7.0，然后將斜面培養基上保藏的乳酸菌菌株接種到高膽固醇培養液中培養，一段時間后加入特定顯色劑，離心，用_____法測定上清液中膽固醇的含量，以_________________________作為對照，測定菌株降低膽固醇的能力，篩選出目的菌株。

Answer 1

【答案】乙 乙同學的結果中，有一個平板的計數結果與另兩個相差懸殊，結果的重復性差 無氧 溶鈣圈（或透明圈） 劃線 高膽固醇 光電比色 未接種的高膽固醇培養液

【解析】

（1）利用稀釋涂布平板法對微生物計數，要注意稀釋倍數的選取，為了保證結果準確，通常選擇菌落數在30～300之間的平板進行計數。（2）利用溶鈣圈法對乳酸菌進行篩選的原理是乳酸菌產生的酸性物質和CaCO3反應而出現溶鈣圈。（3）通過實驗獲得能高效降低膽固醇的乳酸菌菌株，自變量是加入高膽固醇的普通的MRS液體培養液中是否接種乳酸菌菌株，因變量是培養液中膽固醇的含量，可以采用光電比色法測定。

(1) 表中信息顯示：乙同學的結果中，有一個平板的計數結果與另兩個相差懸殊，結果的重復性差，說明乙同學的結果可信度低。

(2) 乳酸菌屬于厭氧菌，因此需要在無氧條件下培養。乳酸菌產生的乳酸和MRS培養基中的CaCO3反應而出現溶鈣圈。可見，為獲取純種乳酸菌，應挑取有溶鈣圈的菌落，而后將該菌落用平板劃線法接種在MRS斜面培養基上保藏備用。

(3) 為獲得能高效降低膽固醇的乳酸菌菌株，在普通的MRS液體培養基中應添加適量的高膽固醇并用超聲波振蕩乳化20min，調pH至7.0，然后將斜面培養基上保藏的乳酸菌菌株接種到高膽固醇培養液中培養。一段時間后加入特定顯色劑，離心，用光電比色法測定上清液中膽固醇的含量，以未接種的高膽固醇培養液作為對照，測定菌株降膽固醇的能力，篩選出目的菌株。