Question

【題目】土壤農桿菌是一種能引起雙子葉植物產生冠癭瘤的土壤細菌，它帶有一個大的質粒叫Ti質粒（含冠癭瘤基因），它攜帶細菌DNA向宿主植物基因組轉化所需信息的重要片段，只有T—DNA片段才轉入植物細胞的基因組。其結構及轉化過程如圖所示，回答相關問題

（1）若用Ti質粒作為抗旱基因的載體，為了使某種植物具有抗旱性狀而又不引起植物產生冠癭瘤，需對Ti質粒進行修飾，即 ，將抗旱基因轉移至Ti質粒的 中，且要保證復制起始位點和 不被破壞。然后在一定條件下將外植體在含有 的土壤農桿菌的稀釋培養基上培養，使得抗旱基因轉入植物細胞并整合到植物基因組中。

（2）將上述外植體置于一個含有某種抗生素的合適培養基中進行篩選，發生轉化的外植體通過 形成愈傷組織，再通過 產生不定芽和體細胞胚再長出整個植物。

（3）基因轉化是否成功應對轉基因植物進行鑒定，如果培育成的植株能適應干旱環境，還應進行 水平鑒定，以確定該變異能否遺傳給后代。為獲得純合的轉基因植株，還需要對轉基因植株進行 。

Answer 1

【答案】

（1）去除瘤基因 T—DNA 用于轉移T—DNA的片段 重組Ti質粒

（2）脫分化 再分化

（3）DNA 連續自交（單倍體育種）（1分）

【解析】分析題圖：圖示為Ti質粒結構及轉化過程圖．Ti質粒（含冠癭瘤基因），它攜帶細菌DNA向宿主植物基因組轉化所需信息的重要片段，只有T-DNA片段才轉入植物細胞的基因組。轉化過程為：將抗旱基因轉移至Ti質粒的T-DNA中，然后在一定條件下將外植體在含有重組Ti質粒的土壤農桿菌的稀釋培養基上培養，使得抗旱基因轉入植物細胞并整合到植物基因組中。

（1）Ti質粒含冠癭瘤基因，能引起雙子葉植物產生冠癭瘤，因此以Ti質粒作為抗旱基因的載體時，為了使某種植物具有抗旱性狀而又不引起植物產生冠癭瘤，需去除Ti質粒的冠癭瘤基因；根據題干信息“只有T-DNA片段才轉入植物細胞的基因組”和“Ti攜帶細菌DNA向宿主植物基因組轉化所需信息的重要片段”可知，應將抗旱基因轉移至Ti質粒的T-DNA中，且要保證復制起始位點和用于轉移T-DNA的基因片段不被破壞．然后在一定條件下將外植體在含有重組Ti質粒的土壤農桿菌的稀釋培養基上培養，使得抗旱基因轉入植物細胞并整合到植物基因組中。（2）外植體培養成新植體的過程為：外植體——（脫分化）→愈傷組織——（再分化）→不定芽和體細胞胚→新植體。（3）基因轉化是否成功應對轉基因植物進行鑒定，如果培育成的植株能適應干旱環境，還應進行DNA水平鑒定，以確定該變異能否遺傳給后代。通過轉基因技術獲得的個體為雜合子，為獲得純合的轉基因植株，還需要對轉基因植株進行嚴格的自交，直到后代不出現性狀分離為止。