Question

(9分)為擴(kuò)大可耕地面積，增加糧食產(chǎn)量，沿海灘涂鹽堿地的開發(fā)利用備受關(guān)注。我國科學(xué)家應(yīng)用耐鹽堿基因培育出了耐鹽堿水稻新品系。請據(jù)圖回答下列問題：

圖1　轉(zhuǎn)基因操作流程圖

表2　幾種限制酶識別序列及切割位點(diǎn)表
(1) 獲取真核生物的基因通常采用人工合成法，通過圖示中①方法合成的耐鹽堿基因中是不含____________的，如果要將耐鹽堿基因和質(zhì)粒重組，應(yīng)該在基因兩側(cè)的A和B位置除了接上以上兩個結(jié)構(gòu)外還需分別加入____________限制酶識別序列，這樣設(shè)計的優(yōu)點(diǎn)有利于質(zhì)粒和目的基因定向連接。
(2) 過程②采用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，在PCR反應(yīng)體系需加入引物Ⅰ和引物Ⅱ等物質(zhì)，若目的基因擴(kuò)增4代，則共用了引物Ⅰ________個。
(3) 請畫出Pst Ⅰ切割DNA形成黏性末端的過程：__________________________。
(4) 圖示中將基因表達(dá)載體構(gòu)建完成后沒有直接導(dǎo)入農(nóng)桿菌，而是先將其導(dǎo)入大腸桿菌，目的是____________________。
(5) 在步驟⑤⑥過程中都需用__________________________處理兩類細(xì)菌。為了確認(rèn)目的基因通過⑦過程導(dǎo)入植物細(xì)胞中后是否成功表達(dá)，通常從分子水平進(jìn)行檢測的方法是用____________法。
(6) 假設(shè)該抗鹽堿基因D，通過基因工程導(dǎo)入水稻后連接到水稻的一條染色體上，則該水稻進(jìn)行減數(shù)分裂的細(xì)胞在聯(lián)會時有________個D基因。

Answer 1

(1) 啟動子和終止子　EcoRⅠ、SmaⅠ
(2) 15
(3)
(4) 獲取大量重組質(zhì)粒(讓目的基因擴(kuò)增)
(5) Ca^2＋　抗原—抗體雜交
(6) 2

解析