Question

【題目】亞麻酸（ALA）能夠促進卵母細胞體外成熟和囊胚發育。為了給水牛體外胚胎產業化生 產中合理使用亞麻酸提供理論依據，科研人員研究了不同濃度的亞麻酸對水牛卵母細胞體外成熟、早 期胚胎發育的影響。分析回答：

①卵母細胞的收集和體外培養：從屠宰場水牛的卵巢中收集并處理卵母細胞，隨機分成5組，分 別置于不同濃度亞麻酸的培養液中，在39℃、5%CO2 的培養箱中培養22～24h。

②卵母細胞成熟判斷：在顯微鏡下觀察卵母細胞，判斷其是否成熟，統計結果如表1。

③體外受精：在受精溶液中進行體外受精后，用顯微鏡觀察判斷是否完成受精。

④早期胚胎培養：將受精卵移入胚胎培養液中培養44～48h后檢查分裂情況，每隔48h更換一次 培養液，第 5～9天觀察囊胚發育情況，統計結果如表2。

（1）步驟①中，細胞培養箱中加5%CO2 的作用是____ 。

（2）步驟②中，成熟卵母細胞內染色體的行為特征是__ 。步驟③中，判斷是否受精的依據是____。

（3）步驟④中，受精卵經過_____時期）發育成囊胚，培養過程定期更換培養液的目的是____。

（4）根據實驗數據分析，亞麻酸溶液為200μmol·L-1 時，對水牛卵母細胞體外成熟和囊胚發育起_____ 作用。

（5）本實驗結果表明，__________的亞麻酸對水牛卵母細胞體外成熟和囊胚發育都較有利，其判斷依據 是__________。

Answer 1

【答案】維持培養液 pH 的相對穩定 染色體的著絲點排列在赤道板上 在卵細胞膜和透明帶的間隙可否觀察到兩個極體 卵裂期、桑椹胚 清除有害代謝產物，補充營養物質 促進 50μmol·L-1 核成熟卵子數占卵母細胞的比例較高，囊胚數占培養卵數的比例較高

【解析】

本題中涉及到動物細胞培養、體外受精、早期胚胎培養等動物細胞工程技術手段。體外受精所用的卵母細胞必須是培養到減數第二次分裂中期的細胞才是成熟的卵母細胞。早期胚胎發育過程為：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原腸胚。

（1）步驟①是動物細胞培養的過程，細胞培養箱中加5%CO2 的作用是維持培養液pH的相對穩定。

（2）成熟的卵母細胞是培養到減數第二次分裂中期的細胞，減數第二次分裂中期的特征是染色體的著絲點排列在赤道板上；步驟③中判斷是否受精的依據是在卵細胞膜和透明帶的間隙可否規察到兩個極體。

（3）受精卵經過卵裂期、桑椹胚發育成囊胚，培養過程定期更換培養液的目的是清除有害代謝產物，補充營養物質。

（4）從表中數據可以看出，表格1和2中亞麻酸溶液為0μmolL-1的一組為對照組，與其相比，亞麻酸溶液為200μmolL-1時，核成熟卵子數占卵母細胞的比例較高，囊胚數占培養卵數的比例較高，因此可知200μmol·L-1 時，對水牛卵母細胞體外成熟和囊胚發育起促進作用。

（5）根據表中數據，當核成熟卵子數占卵母細胞的比例較高，囊胚數占培養卵數的比例較高時所對應的亞麻酸的濃度為50μmol·L-1，此濃度對水牛卵母細胞體外成熟和囊胚發育都較有利。