Question

【題目】埃博拉病毒是一種能導致人類及脊椎動物出血熱的致死性病毒，有很高的致死率。埃博拉病毒的NP蛋白在病毒復制中具有重要作用，也是診斷該病重要的靶蛋白。下圖是某科研機構(gòu)研制抗NP蛋白單克隆抗體的流程圖。回答下列問題：

(1)①過程需要_________酶催化。在體外擴增大量NP蛋白基因需要采用____________(填中文名稱)反應(yīng)，該反應(yīng)的實質(zhì)是____________。

(2)在NP蛋白基因表達載體上NP蛋白基因的首尾兩端分別為___________、___________。

(3)過程③獲得的雜交瘤細胞能無限增殖，是由于該細胞中含有來自于__________細胞的遺傳物質(zhì)。獲得單克隆抗體需要經(jīng)過兩次篩選，其中第二次篩選的目的是____________。

Answer 1

【答案】反(逆)轉(zhuǎn)錄 聚合酶鏈式 DNA復制 啟動子 終止子 小鼠骨髓瘤 獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞

【解析】

①逆轉(zhuǎn)錄、②構(gòu)建基因表達載體、③細胞融合。

（1）①逆轉(zhuǎn)錄需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化。體外擴增目的基因常用PCR技術(shù)，全稱是多聚酶鏈式反應(yīng)，其原理是DNA的復制。

（2）構(gòu)建基因表達載體時，需要把目的基因插入到啟動子和終止子之間，啟動子是RNA聚合酶結(jié)合的位點，啟動轉(zhuǎn)錄。

（3）經(jīng)過③細胞融合可以獲得雜交瘤細胞，因為雜交瘤細胞含有小鼠的骨髓瘤細胞，骨髓瘤細胞可以無限增殖，故雜交瘤細胞也可以無限增殖。單克隆抗體制備的過程中需要經(jīng)過兩次篩選，第一次是用選擇培養(yǎng)基篩選得到雜交瘤細胞；第二次是進行專一抗體檢測，獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。