Question

【題目】圖l表示含有目的基因D的DNA片段和部分堿基序列，圖2表示一種質粒的結構和部分堿基序列．現有MspI、BamHI、MboI、SmaI四種限制性核酸內切酶，它們識別的堿基序列和酶切位點分別為：C↓CGG，G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG．下列分析中正確的是（　　）

A. 若用限制酶MspI完全切割圖1中DNA片段，會破壞2個磷酸二酯鍵

B. 若圖1用限制酶SmaI完全切割后會產生4種不同的DNA片段

C. 若切割圖2中的質粒以便拼接目的基因D應選擇限制酶BamHI和MboI

D. 導入含有目的基因D的重組質粒的細菌在添加抗生素A和B的培養基上不能存活

Answer 1

【答案】D

【解析】

圖1中DNA片段含有2個限制酶SmaⅠ切割位點，若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，能產生2個平末端，產生三種DNA片段，基因D兩側序列為GGATCC，可被限制酶BamHⅠ切割；圖2中：質粒含有CCGG序列、GGATCC序列和GATC序列，其中CCGG序列可被限制酶MspⅠ切割，GGATCC序列和GATC序列可被限制酶MboⅠ切割，用限制酶BamHⅠ切割破壞了抗生素A抗性基因，但沒有破環抗生素B抗性基因，因此含有重組質粒的大腸桿菌能抗抗生素B，但不能抗抗生素A。

圖1中DNA片段含有2個限制酶MspI切割位點，若用限制酶MspI完全切割圖1中DNA片段，會破壞4個磷酸二酯鍵，A錯誤；圖1中DNA片段含有2個限制酶SmaⅠ切割位點，若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，能產生2個平末端，產生3種不同的DNA片段，B錯誤；目的基因兩側是GGATCC序列，質粒上也有該堿基序列，該序列是限制酶BamHⅠ的識別序列，若用MboI切割，則會將質粒定的兩個標記基因都破壞，因此要將質粒和目的基因D連接形成重組質粒，應選用限制酶BamHⅠ切割，C錯誤；用限制酶BamHⅠ切割破壞了抗生素A抗性基因，但沒有破環抗生素B抗性基因，因此含有重組質粒的大腸桿菌能抗抗生素B，不能抗抗生素A，因此在添加抗生素A和B的培養基上不能存活，D正確。