Question

【題目】[生物——選修3：現代生物科技專題]下圖表示利用羊生產抗凝血酶的過程，圖中ampR表示氨芐青霉素抗性基因，tetR表示四環素抗性基因，BamH I、Hind Ⅲ、Sma I為三種限制酶及酶切位點，據圖回答問題：

（1）通常采用_______技術來擴增獲得抗凝血酶基因，其原理是_________，需要_______酶。據圖分析，可將目的基因插入________抗性基因中。

（2）質粒的化學本質是______，除質粒外，還有______（至少寫出兩種）也可以充當載體。

（3）過程①可采用______的方法將重組質粒導入羊受精卵中，可采用_____技術來檢測抗凝血酶基因是否轉錄成功。

Answer 1

【答案】 PCR DNA雙鏈復制 熱穩定DNA聚合（Taq） 四環素（tetR） DNA（小型環狀DNA） 噬菌體的衍生物、動物或植物病毒（答上述兩個即可給分） 顯微注射 分子雜交

【解析】分析圖解：圖中目的基因抗凝血酶基因左側用BamHⅠ切割，右側用HindⅢ切割或者SamⅠ酶切割；在質粒上只有BamHⅠ和HindⅢ兩種酶的切割位點，所以切割目的基因只能選BamHⅠ和HindⅢ切割，且正好插入質粒的tetR基因中。

（1）要獲得大量目的基因，通常采用PCR擴增技術擴增，該技術是利用DNA雙鏈復制的原理，在熱穩定DNA聚合（Taq）酶的催化下，以特定引物和四種脫氧核苷酸為原料，合成大量目的基因。據圖，僅將抗凝血酶基因切割下來，需要在抗凝血酶基因的左側用BamHⅠ切割，右側用HindⅢ切割。當抗凝血酶基因和質粒連接成重組質粒后，tetR基因被抗凝血酶基因隔開，即抗凝血酶基因插入到了tetR基因中。

（2）質粒的化學本質是小型環狀DNA 。除質粒外，還有噬菌體的衍生物、動物或植物病毒可以作為運載體。

（3）目的基因導入動物細胞——受精卵，方法一般是顯微注射法。檢測抗凝血酶基因是否轉錄成功一般采用基因探針進行分子雜交的方法。