Question

15．幽門螺桿菌（Hp）感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素．在患者體內采集樣本并制成菌液后，進行分離培養．實驗基本步驟如下：配制培養基→滅菌、倒平板→X→培養→觀察
請回答：
（1）在配制培養基時，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因為Hp含有①脲酶，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周圍會出現 ②紅色環帶．
（2）下列對尿素溶液進行滅菌的最適方法是③D滅菌．
A．高壓蒸汽    B．紫外燈照射     C.70%酒精浸泡     D．過濾
（3）步驟X表示④接種．在無菌條件下操作時，先將菌液稀釋，然后將菌液⑤涂布到培養基平面上．菌液稀釋的目的是為了獲得⑥單菌落．
（4）在培養時，需將培養皿倒置并放在⑦恒溫培養箱中．若不倒置培養，將導致⑧無法形成單菌落．
（5）臨床上用¹⁴C呼氣試驗檢測人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將¹⁴C標記的⑨尿素分解為NH₃和¹⁴CO₂．

Answer 1

分析 1、接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞．微生物的營養物質有5類，分別是水、無機鹽、碳源、氮源及生長因子．
2、由于細菌分解在尿素的過程中合成脲酶，脲酶將尿素分解成氨，會使培養基堿性增強，PH升高，所以可以用檢測pH的變化的方法來判斷尿素是否被分解，可在培養基中加入酚紅指示劑，尿素被分解后產生氨，PH升高，指示劑變紅．

解答 解：（1）由于細菌分解在尿素的過程中合成脲酶，脲酶將尿素分解成氨，會使培養基堿性增強，PH升高，指示劑變紅．
（2）由于尿素在高溫下會分解，所以對尿素溶液的滅菌要采用G6玻璃漏斗過濾的方法．
（3）在實驗操作過程中要先滅菌、倒平板，再進行接種．接種時先將菌液稀釋，以獲得單一菌落，再涂布到培養基平面上．
（4）培養時需將培養皿倒置并放在恒溫箱中培養，倒置培養的目的也是為了獲得單一菌落．
（5）如果人體感染了Hp，能將尿素分解為NH₃和CO₂，因而標記尿素中的C，可通過呼吸產物來判斷是否感染Hp．
故答案為：
（1）脲酶　紅　
（2）D　
（3）接種　涂布　單　
（4）恒溫培養箱　無法形成單菌落　
（5）尿素

點評 微生物的實驗室分離是選修一的重點內容，考生需重點掌握教材的基礎知識點，注意歸納總結，把握知識間的內在聯系．