下列關(guān)于基因工程的說(shuō)法中正確的有（多選）（ ）
| A．一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列 |
| B．DNA聚合酶可以用來(lái)“縫合”目的基因與運(yùn)載體之間的缺口 |
| C．“不同的DNA分子具有相同的雙螺旋結(jié)構(gòu)”是基因工程成功實(shí)施的基礎(chǔ) |
| D．黏性末端堿基對(duì)之間的連接需要DNA連接酶的催化 |
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科目：高中生物 來(lái)源：上海市十三校2012屆高三第二次聯(lián)考生物試題 題型：071
回答下列關(guān)于基因工程的相關(guān)問(wèn)題。
質(zhì)粒是基因工程中的一種常用的工具之一，經(jīng)修飾改造后的質(zhì)粒如下圖七一1所示。PUC118上的Lacz基因編碼β半乳糖苷酶的一條多肽鏈，其表達(dá)產(chǎn)物與菌落顏色有關(guān)；經(jīng)“修飾”后的“多克隆位點(diǎn)”位于LacZ基因之中。AmpR是抗氮卞青霉素基因。
1．PUC118上的基因AmpR作用的是：________“多克隆位點(diǎn)”中含有多種限制酶的識(shí)別序列，如HindⅢ，其切割后產(chǎn)生的DNA片斷中含有的部分序列是
，則限制酶HindⅢ的識(shí)別序列是________。
2．圖2示意將目的基因?qū)氪竽c桿菌的操作步驟。其中，I～V表示操作過(guò)程；A－F表示使用的相關(guān)工其，其中的E1和E2表示有關(guān)的酶。試問(wèn)：E2應(yīng)是________（酶）；經(jīng)過(guò)E2的切割，供體染色體中的DNA片段中游離的磷酸基團(tuán)總數(shù)的變化是：________。
在策略上，圖1中的“多克隆位點(diǎn)”包含了多種、多個(gè)識(shí)別序列，請(qǐng)說(shuō)出設(shè)計(jì)這種“多克隆位點(diǎn)”的目的：________。
3．LacZ基因可以使細(xì)菌在含有X－gttl（5－溴－4－氯－3－吲哚－B－D－半乳糖）底物和IPTG（一種乳糖類似物）的培養(yǎng)基上形成藍(lán)色的菌落，即X－gal被lacZ基因編碼產(chǎn)生的鼻半乳糖昔酶水解成藍(lán)色；若要形成重組質(zhì)粒，則在含X－gal的培養(yǎng)基上將形成白色菌落（而不是藍(lán)色的）。
請(qǐng)據(jù)圖2分析下列問(wèn)題：
①用本無(wú)PUC118的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶C中被連接處理后的DNA混合物傾入含X－gal、IPTG和________的D培養(yǎng)基平板上，其目的是________。
菌落生長(zhǎng)結(jié)果圖2中所示。
②過(guò)程V進(jìn)行轉(zhuǎn)移培養(yǎng)，則該應(yīng)該挑選X、Y、Z中的________菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)。形成該顏色的生理原因是________。如此目的基因便被克隆了！
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