Question

【題目】[生物一一選修3：現代生物科技專題]下圖表示科學家培養轉綠色熒光蛋白基因植物的過程，請回答：

（1）利用打孔器從煙草葉片上取多個大小相等的小圓片與重組農桿菌共培養一晝夜后，接種在含卡那霉素的培養基上，為篩選出被農桿菌感染的小圓片，作為運載體的Ti質粒應含有____________基因，運載體上的___________是RNA聚合酶識別和結合的位點。為了將目的基因整合到煙草細胞的____________上，以上DNA片段都必須在Ti質粒的__________________片段上。

（2）圖中小圓片周圍長出的結構A稱為__________，此后更換培養基時調整組分比例。A經圖中④長出B結構，此過程加入的植物激素主要是______________。④和⑤過程稱為______________。本實驗可使用特殊的儀器在A中檢測目的基因的表達情況，請預測觀察到的現象是____________。

Answer 1

【答案】 卡那霉素抗性基因 啟動子 染色體（核DNA) T-DNA 愈傷組織 生長素和細胞分裂素 再分化 (愈傷組織邊緣或局部細胞）發出綠色熒光

【解析】試題分析：分析題圖：圖示表示科學家培養轉綠色熒光蛋白基因植物的過程，①是利用打孔器從植物葉片上取多個大小相等的小圓片；②是將植物小圓片與重組農桿菌共同培養；③表示脫分化過程，其中A為愈傷組織；④表示再分化過程，B為胚狀體。

（1）作為運載體的Ti質粒應含有標記基因即卡那霉素抗性基因，以便于篩選出被農桿菌感染的小圓片。運載體上的啟動子是RNA聚合酶識別和結合的位點。將目的基因連接到Ti質粒的T-DNA 上，質粒可將目的基因整合到煙草細胞的染色體上。

（2）由以上分析可知，圖中小圓片周圍長出的結構A為愈傷組織。結構B為胚狀體，A經過④再分化長出B結構，需要在培養液中加植物激素即生長素和細胞分裂素。④和⑤過程是由愈傷組織形成的，屬于再分化過程。用特殊的儀器在A中檢測目的基因的表達情況，若目的基因（綠色熒光蛋白基因）已經成功導入受體細胞并表達，應該會觀察綠色熒光。