Question

I 已知SARS是由一種RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預防SARS病毒的疫苗，開展了前期研究工作。其簡要的操作流程如下：

 

 

 

 

 

 

（1）實驗步驟①所代表的反應過程是             。

（2）步驟②構建重組表達運載體A和重組表達運載體B必須使用限制性內切酶和

          酶，后者的作用是將用限制性內切酶切割的            和          連接起來。

（3）如果省略步驟②而將大量擴增的S基因直接導入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能              ，也不能            。

（4）為了檢驗步驟④所表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應特性，可用

                與                  進行抗原―抗體特異性反應實驗，從而得出結論。

II． 1958年，Meselson和Stahl通過一系列實驗首次證明了DNA的半保留復制，此后科學家便開始了有關DNA復制起點數目、方向等方面的研究。試回答下列問題：

（1）由于DNA分子呈___________結構，DNA復制開始時首先必需解旋從而在復制起點位置形成復制叉（如圖1）。因此，研究中可以根據復制叉的數量推測___________________。

（2）1963年Cairns將不含放射性的大腸桿菌（擬核DNA呈環狀）放在含有³H-胸腺嘧啶的培養基中培養，進一步證明了DNA的半保留復制。根據右邊的大腸桿菌親代環狀DNA示意圖，在答題紙的相應方框內用簡圖表示復制一次和復制兩次后形成的DNA分子。（注：以“……”表示含放射性的脫氧核苷酸鏈）。

（3）DNA的復制從一點開始以后是單向還是雙向進行的，用不含放射性的大腸桿菌DNA放在含有³H-胸腺嘧啶的培養基中培養，給以適當的條件，讓其進行復制，得到圖3所示結果，這一結果說明________________。

（4）為了研究大腸桿菌DNA復制是單起點復制還是多起點復制，用第（2）題的方法，觀察到的大腸桿菌DNA復制過程如圖4所示，這一結果說明大腸桿菌細胞中DNA復制是            起點復制的。

Answer 1

 I  （1）逆轉錄   

（2）DNA連接     運載體     S基因

（3）復制    合成S基因的mRNA  

（4）大腸桿菌中表達的S蛋白   SARS康復病人血清（或抗S蛋白的特異性抗體）

II．

（1）（立體的規則）雙螺旋      復制起點數量 

（2）下圖（4分，每個正確答案得2分）

（3）DNA復制是雙向的 

（4）單