Question

44.（10分）探針是指以放射性同位素、生物素或熒光染料等進行標記的已知核苷酸序列的核酸片段，可用于核酸分子雜交以檢測目標核苷酸序列是否存在。下圖一是某實驗小組制備的兩種探針，圖二是探針與目的基因雜交的示意圖。請回答下列有關問題：

（1）核酸探針與目標核苷酸序列間的分子雜交遵循__________。設計核苷酸序列是核酸探針技術關鍵步驟之一。圖一所示的兩種核酸探針（探針2只標注了部分堿基序列）都不合理，請分別說明理由__________、__________。

（2）cDNA探針是目前應用最為廣泛的一種探針。制備cDNA探針時，首先需提取、分離獲得__________作為模板，在__________的催化下合成cDNA探針。利用制備好的-珠蛋白基因的cDNA探針與-珠蛋白基因雜交后，出現了如圖二中甲、乙、丙、丁等所示的“發夾結構”，原因是____________________。

（3）基因工程中利用乳腺生物反應器生產-抗胰蛋白酶，應選用__________切割含有目的基因的DNA片段和載體，并用__________方法導入__________中，再利用SRY探針（Y染色體上的性別決定基因）進行檢測，將檢測反應呈__________（選填“陽”、“陰”）性的胚胎進行移植培養。

Answer 1

44. 堿基互補配對原則  探針1堿基序列過短，特異性差  探針2自身折疊后會出現部分堿基互補配對而失效

（2）mRNA  逆轉錄酶        -珠蛋白基因中含有不表達序列（或內含子）

（3）同種限制酶    顯微注射    受精卵    陰性