Question

【題目】GOLS2基因表達可提高植物細胞內糖類含量，降低植物葉片氣孔開度。科研人員將擬南芥GOLS2基因導人并整合到水稻染色體上。請回答下列問題：

（1）從cDNA文庫中獲得的目的基因___________ （填“含有”或“不含有”）啟動子和終止子。通過PCR技術獲取GOLS2基因的原理是_________________________，需設計_____種引物。

（2）GOLS2基因可以整合到水稻染色體上的遺傳學物質基礎是____________。需將GOLS2基因拼接在運載體上才能成功轉化，轉化指的是___________________。

（3）基因表達載體的組成除了GOLS2基因外，還必須有___________等；在構建基因表達載體過程中，常把兩個啟動子串聯在一起形成雙啟動子，加在GOLS2基因上游，雙啟動子的作用可能是________________，進一步提高細胞內糖類含量。

Answer 1

【答案】不含有 DNA雙鏈復制 2 不同生物DNA分子的基本結構相同 目的基因進入受體細胞內，并在受體細胞內維持穩定和表達的過程 標記基因、啟動子、終止子 保證目的基因的高效轉錄（表達）

【解析】

cDNA文庫只包含該物種部分基因，同一物種的cDNA文庫不只1種，真核生物的基因組文庫中的基因含有內含子、啟動子、終止子等，而從某生物cDNA文庫中獲取的目的基因不含有啟動子、終止子、內含子和非編碼區等。一個基因表達載體的組成主要有目的基因、標記基因、啟動子和終止子，其中啟動子位于基因首端，是RNA聚合酶識別和結合的位點，標記基因的作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。

（1）cDNA基因文庫中的DNA是通過逆轉錄產生的，所以從cDNA文庫中獲得的目的基因不含有啟動子和終止子。通過PCR技術獲取GOLS2基因的原理是DNA雙鏈復制，需設計2種引物。

（2）由于不同生物DNA分子的基本結構相同，所以GOLS2基因可以整合到水稻染色體上。基因工程中的轉化指的是目的基因進人受體細胞內，并在受體細胞內維持穩定和表達的過程。

（3）基因表達載體的組成除了GOLS2基因外，還必須有標記基因、啟動子、終止子等；在構建基因表達載體過程中，常把兩個啟動子串聯在一起形成雙啟動子，加在GOLS2基因上游，雙啟動子的作用可能是保證目的基因的高效轉錄（表達），進一步提高細胞內糖類含量。