Question

16．毛角蛋白Ⅱ型中間絲（KIFⅡ）基因與絨山羊的羊絨質量密切相關．獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊的簡單流程如圖．

（1）過程①中最常用的運載工具是質粒，所需要的酶是限制性核酸內切酶和DNA連接酶．
（2）在過程②中，用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理將皮膚組織塊分散成單個成纖維細胞．在培養過程中，將成纖維細胞置于5% CO₂的氣體環境中，CO₂的作用是維持培養基（液）的pH．
（3）在過程③中，用促性腺激素處理以獲取更多的卵（母）細胞．
（4）在過程④中，對成熟卵（母）細胞進行去核處理．
（5）從重組細胞到早期胚胎過程中所用的胚胎工程技術是（早期）胚胎培養．在胚胎移植前，通過胚胎分割技術可獲得較多胚胎．

Answer 1

分析 分析圖解：圖中①表示基因表達載體的構建，一般將目的基因與運載體利用限制酶和DNA連接酶構成重組質粒；過程②表示利用動物細胞培養技術培養受體細胞；過程③為通過超數排卵的方法獲得更多的卵細胞，過程④表示細胞核移植過程．

解答 解：（1）基因工程中，運載工具包括質粒、噬菌體及動植物病毒等，其中質粒是主要運載工具；①表示基因表達載體的構建過程，首先需要限制酶切割含有目的基因的DNA和運載體DNA，再用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組質粒．
（2）胰蛋白酶可將組織塊分散成單個細胞；動物細胞培養過程中需要一定的氣體環境（95%氧氣和5%二氧化碳），其中5%CO₂的作用是維持培養基（液）的pH．
（3）要得到更多的卵（母）細胞需用促性腺激素對動物進行超數排卵處理．
（4）成熟卵（母）細胞在核移植前需要進行去核處理，以保證克隆后代的遺傳性狀主要來自于供體核．
（5）從重組細胞到早期胚胎需要才用早期胚胎培養技術；在胚胎移植時，可通過胚胎分割技術獲得更多的胚胎．
故答案為：
（1）質粒      限制性核酸內切酶和DNA 連接酶
（2）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶 ）     維持培養基（液）的pH
（3）促性腺激素
（4）去核
（5）（早期）胚胎培養       胚胎分割

點評 本題結合轉基因山羊培育過程圖，考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關知識，要求考生識記所列知識要點，能準確判斷圖中各過程的名稱，并能在較簡單的情境中使用，屬于考綱識記層次的考查．