Question

5．降鈣素是一種多肽類激素，臨床上用于治療骨質疏松癥等．某科學機構為了研發一種活性高、半衰期長的新型降鈣素，從預期新型降鈣素的功能出發，推測相應的脫氧核苷酸序列，并人工合成了兩條72個堿基的DNA單鏈，兩條鏈通過18個堿基對形成部分雙鏈DNA片段，再利用Klenow酶補平，獲得雙鏈DNA，過程如圖：獲得的雙鏈DNA經EcoRⅠ（識別序列和切割位點  ）和BamHⅠ（識別序列和切割位點 ）雙酶切后插入大腸桿菌質粒中．下列有關分析錯誤的是（　　）

• A． Klenow酶是一種DNA聚合酶
• B． 鑒定和選擇重組質粒，需要大腸桿菌質粒中含有標記基因
• C． EcoRⅠ和BamHⅠ雙酶切的目的是將目的基因連接進入載體，并且用不同的酶可以固定連接方向
• D． 合成的雙鏈DNA有72個堿基對

Answer 1

分析 分析圖解：圖為人工合成的方法獲取目的基因，觀察圖可以發現通過Klenow酶能夠將單鏈DNA延伸，并且中間形成18個堿基對，則兩側分別有（72-18）=54個堿基．由于EcoRⅠ和BamHⅠ的識別序列和切點不同，所以用EcoRⅠ和BamHⅠ同時切割，目的基因兩側形成的黏性末端不同，載體也是，這樣可以保證目的基因和載體定向連接，形成重組質粒．

解答 解：A、根據題意“兩條鏈通過18個堿基對形成部分雙鏈DNA片段，再利用Klenow酶補平，獲得雙鏈DNA”可知Klenow酶是以DNA單鏈為模板，使子鏈延長的DNA聚合酶，A正確；
B、篩選重組質粒需要大腸桿菌質粒中含有標記基因，B正確；
C、用不同的酶切可以產生不同的黏性末端，有利于目的基因和運載體的定向連接，C正確；
D、根據“人工合成了兩條72個堿基的DNA單鏈，兩條鏈通過18個堿基對形成部分雙鏈DNA片段”可推出合成的DNA雙鏈堿基對是72×2-18=126個堿基對，D錯誤．
故選：D．

點評 本題難度適中，屬于考綱中理解層次的要求，以“降鈣素”為素材，考查基因工程、胚胎移植和蛋白質工程等知識，意在考查考生對所學知識的掌握、獲取圖文信息能力和分析推理能力的培養．