Question

（10分）將動物致病菌的抗原基因?qū)�入馬鈴薯制成植物疫苗，飼喂轉(zhuǎn)基因馬鈴薯可使動物獲得免疫力。以下是與植物疫苗制備過程相關(guān)的圖和表。請根據(jù)以下面的圖表回答下列問題。

（1）在采用常規(guī)PCR方法擴增目的基因的過程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內(nèi)           的DNA聚合酶，其最主要的特點是                          。

（2）PCR過程中退火（復(fù)性）溫度必須根據(jù)引物的堿基數(shù)量和種類來設(shè)定。表1為根據(jù)模板設(shè)計的兩對引物序列，圖2為引物對與模板結(jié)合示意圖。請判斷哪一對引物可采用較高的退火溫度？__________。

（3）為將外源基因轉(zhuǎn)入馬鈴薯，圖1步驟⑥轉(zhuǎn)基因所用的細菌B通常為               。

（4）對符合設(shè)計要求的重組質(zhì)粒T進行酶切，。假設(shè)所用的酶均可將識別位點完全切開，請根據(jù)圖1中標示的酶切位點和表2所列的識別序列，對以下酶切結(jié)果作出判斷。

①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到_________種DNA片斷。

②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到_________種DNA片斷。

 

Answer 1

【答案】

（10分，每空2分）

（1）耐高溫  （2）引物對B  （3） 農(nóng)桿菌 （4）①2  ②1

【解析】PCR技術(shù)是在體外對DNA進行擴增，所用的DNA聚合酶與體內(nèi)DNA聚合酶不同，是耐高溫的DNA聚合酶，過程為變性使DNA分子兩條鏈鈖旋開來，復(fù)性是讓引物與DNA解旋開來的單鏈互補配對，延伸是在DNA聚合酶的作用在引物引導(dǎo)下合成子代DNA分子，耐高溫的DNA分子中通常含有G與C堿基比例大，因為它們之間形成三個氫鍵，而A與T之間只有兩個氫鍵，把目的基因?qū)�入植物細胞通常采用的是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。根據(jù)DNA分子上各自有這些酶的酶切位點數(shù)目可知，采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到2種DNA片斷，采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到1種DNA片斷。