Question

【題目】某化工廠的污水池中，含有一種有害的、難于降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養基，成功地篩選到能高效降解化合物A的細菌(目的菌)實驗的主要步驟如下圖所示。請分析回答問題。

(1)接種前需要對培養基及培養皿等進行滅菌，常用的滅菌方法是____________。培養基中加入化合物A的目的是篩選________。

(2)實驗需要振蕩培養，由此推測“目的菌”的代謝類型是____________。

(3)培養若干天后，應選擇培養瓶中化合物A含量________的培養液。

(4)轉為固體培養時，為獲得單菌落進行繼續篩選，常采用平板劃線法或____________法，接種后，應將培養皿________(填“正放”或“倒置”)

(5)下列有關平板劃線操作的敘述，錯誤的是（____）

A．在操作的第一步以及每次劃線之前都要將接種環放在火焰上灼燒

B．將已冷卻的接種環伸入菌液中蘸取一環液

C．蘸取菌液和劃線要在火焰旁進行

D．劃線時要將最后一區的劃線與第一區的劃線相連

(6)實驗結束時，使用過的培養基應該進行________處理后，才能倒掉。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌法 目的菌 異養需氧型 減少 稀釋涂布平板 倒置 D 滅菌

【解析】

接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落。

在每次劃線前后都要對接種環進行滅菌，接種環的滅菌方法應是在火焰上灼燒，接種時劃線操作是在火焰邊進行。

閱讀題干和題圖可知，本題是選擇和分離降解的有機化合物A的菌種的過程，根據問題涉及的具體內容梳理相關知識點，然后分析綜合進行解答。

（1）由題意可知，本實驗是分離出降解的有機化合物A的菌種。培養基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，培養基中加入化合物A的目的是篩選降解的有機化合物A的目的菌種。

（2）實驗需要振蕩培養，由此推測“目的菌”的代謝類型是異養需氧型，振蕩培養的目的是增加溶解氧，使營養物質充分利用。

（3）由于“目的菌”有降解的有機化合物A的作用，所以培養若干天后，應選擇培養瓶中化合物A含量減少的培養基。

（4）轉為固體培養時，常采用平板劃線法或稀釋涂布平板法進行接種，分離獲得單菌落．接種后，為防止皿蓋上凝集的水珠落入培養基造成污染，應將培養皿倒置。

（5）在操作的第一步以及每次劃線之前都要將接種環放在火焰上灼燒，A正確；接種環必須冷卻后，才可以伸入菌液中蘸取一環液，否則會燒傷或燒死微生物，B正確；蘸取菌液和劃線要在火焰旁進行，防止空氣中的雜菌，C正確；劃線時要避免最后一區的劃線與第一區線連。因為最后一區是細菌最稀少的，而第一區是細菌最致密的，如果連在一起則有可能影響單個菌落的分離效果，D錯誤。

（6）實驗結束后要對使用過的器具、培養基進行滅菌處理，其目的是防止雜菌釋放到環境中造成環境污染。