Question

【題目】土壤有“微生物的天然培養基”之稱。土壤中的微生物數量最大、種類最多。下列關于“檢測土壤中細菌總數”實驗操作的敘述不正確的是（ ）

A.將土壤稀釋液涂布于各組平板上

B.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養基，經高溫、高壓滅菌后倒平板

C.確定對照組無菌后，選擇菌落數在300以上的實驗組平板進行計數

D.將實驗組和對照組平板倒置，37℃恒溫培養24~48小時

Answer 1

【答案】C

【解析】

統計菌落數目的方法：
（1）顯微鏡直接計數法
①原理：利用特定細菌計數板或血細胞計數板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數量；②方法：用計數板計數； ③缺點：不能區分死菌與活菌。
（2）間接計數法（活菌計數法）
①原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。
②操作
a、設置重復組，增強實驗的說服力與準確性。
b、為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數。
③計算公式：每克樣品中的菌株數＝（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數。

A、測定土壤中細菌總數利用稀釋涂布平板法，即取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1ml，分別涂布于各組平板上，A正確；
B、用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養基，經高溫、高壓滅菌后倒平板，B正確；
C、確定對照組無菌后，選擇菌落數在30～300之間的實驗組平板進行計數，C錯誤；
D、將實驗組和對照組平板倒置，37℃恒溫培養24～48小時，D正確。
故選C。