(12分)PCR是聚合酶鏈式反應簡稱,可以完成特定基因的體外復制,標準的PCR過程如下圖,一次循環,DNA含量就增加一倍,下圖為一次循環
(1)PCR中使雙鏈DNA模板的形成單鏈DNA,需要加熱,相當于在細胞內完成此過程中 的作用。
(2)在合成互補子鏈過程中,一般不使用DNA聚合酶,而使用Taq酶,請你根據圖解中有關信息確定最可能原因是Taq酶 。
(3)合成與模板互補的DNA鏈是以dNTP(三磷酸脫氧核糖核苷酸)為原料,若用脫氧核糖核苷酸則不能形成互補的子鏈,dNTP可用簡略用下圖解表示。
推測:最終單個dNTP連接形成子代DNA鏈時,要斷裂 個磷酸鍵,并同時為DNA鏈的形成提供 。
(4)若要用PCR技術特異性地拷貝DNA分子上“X基因”,需在PCR反應中加入兩種引物,兩種引物及其與模板鏈的結合位置如下圖1所示。經過一次循環后,產物如下圖2所示。則經 輪循環后,產物中出現如下圖3所示DNA分子;此DNA分子共有 個。
科目:高中生物 來源:2009─2010學年度黑龍江省大慶實驗中學下學期期中考試高二年級生物試卷 題型:綜合題
(16分) PCR是聚合酶鏈式反應的縮寫,利用PCR技術可對目的基因進行擴增。請根據下面PCR反應原理示意圖回答有關問題:
(1)PCR的原理是 。
(2)PCR技術擴增DNA,需要的條件有:
① ② ③ ④ ⑤ ⑥Mg2+ ⑦緩沖液
(3)PCR技術使DNA解鏈是通過 實現的,而不需要 酶。 DNA的這種解鏈現象稱為DNA的 ,在一定的條件下是 (填寫“可逆的”或“不可逆的”)
(4)DNA解鏈后冷卻的目的是讓 與 相結合。
(5)當溫度加熱至70―75 ℃時,是 酶把 脫氧核苷酸,通過 鍵連接到引物上。如此逐漸延伸形成互補鏈,進而使目的基因加倍。這一點體現了該酶與DNA連接酶的不同。
(6)通過重復循環(3)、(4)、(5)過程,使目的基因以 形式擴增。
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科目:高中生物 來源:2010年黑龍江省高二下學期期中考試生物試題 題型:選擇題
下列說法中正確的有幾項( )
(1)PCR是聚合酶鏈式反應的縮寫,通過這一技術,可以在短時間內大量擴增目的基因。
(2)在基因工程操作中,真正被用作載體的質粒,都是在天然質粒基礎上人工改造的。
(3)基因探針是mRNA序列的一段,其上一般具有放射性同位素標記。
(4)基因治療包括體內基因治療和體外基因治療。
A.一項 B.兩項 C.三項 D.四項
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科目:高中生物 來源:2010年湖北省高一生物期末考試生物試題 題型:選擇題
(12分 )PCR是聚合酶鏈式反應簡稱,可以完成特定基因的體外復制,標準的PCR過程如下圖,一次循環,DNA含量就增加一倍,下圖為一次循環
(1)PCR中使雙鏈DNA模板的形成單鏈DNA,需要加熱,相當于在細胞內完成此過程中 的作用。
(2)在合成互補子鏈過程中,一般不使用DNA聚合酶, 而使用Taq酶,請你根據圖解中有關信息確定最可能原因是Taq酶 。
(3)合成與模板互補的DNA鏈是以dNTP(三磷酸脫氧核糖核苷酸)為原料,若用脫氧核糖核苷酸則不能形成互補的子鏈,dNTP可用簡略用下圖解表示。
推測:最終單個dNTP連接形成子代DNA鏈時,要斷裂 個磷酸鍵,并同時為DNA鏈的形成提供 。
(4)若要用PCR技術特異性地拷貝DNA分子上“X基因”,需在PCR反應中加入兩種引物,兩種引物及其與模板鏈的結合位置如下圖1所示。經過一次循環后,產物如下圖2所示。則經 輪循環后,產物中出現如下圖3所示DNA分子;此DNA分子共有 個。
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科目:高中生物 來源: 題型:
(07蘇、錫、常、鎮四市聯考)下圖表示在生物體外獲取DNA(或目的基因)的兩種方式。
圖一示經PCR技術擴增獲取DNA的過程。PCR是聚合酶鏈式反應的縮寫。PCR方法模仿體內DNA的復制過程,首先使DNA變性(加熱至94℃),兩條鏈解開為單鏈;然后冷卻(至55℃)使引物(DNA復制時所需的約20個核苷酸的短鏈)與單鏈相應堿基互補序列結合;再在熱穩定DNA聚合酶(Taq酶)作用下進行延伸(加熱至72℃),即以4種脫氧核苷酸為原料,在引物的引導下合成與模板互補的DNA新鏈。如果2條DNA單鏈各補上一條新鏈即成2個DNA。如此反復循環,DNA以指數形式擴增。上述過程可以在PCR擴增儀中自動完成。
圖二示反轉錄形成DNA的過程。即以mRNA為模板,反轉錄成互補的單鏈DNA,然后在酶的作用下合成雙鏈DNA。
請據圖分析回答:
(1)圖一中的DNA聚合酶的化學本質是 ,它與人體內的DNA聚合酶相比具有 特性。
(2)圖一A中的DNA解鏈過程在人體內可由 催化完成。C過程復制方式的特點是 ,該過程需要 和能量等基本條件。
(3)圖二E中的堿基互補配對方式與圖一C中的不同之處是 。假設圖一中的一個模板DNA分子中有800個堿基對,其中含有腺嘌呤600個,若通過PCR技術共消耗周圍環境中游離的胞嘧啶脫氧核苷酸6200個,則該模板DNA在PCR擴增儀中已經復制了 次。
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