Question

【題目】消癌平是烏骨藤提取物水溶液，臨床上治療胃癌已獲良好療效。欲進一步研究其對癌癥的作用效果，某研究人員進行了以下實驗。

實驗材料：人胃癌細胞SGC-7901細胞株，96孔板，細胞培養液，50mg/mL的消癌平、生理鹽水，CO2培養箱，MTT作用液（一種檢測細胞存活和生長的試劑）等

實驗思路：

取對數生長的細胞，計數后配制成細胞懸液，隨后加入96孔板，置于37℃CO2培養箱。將細胞懸液均分成6組，用生理鹽水和藥物（不同濃度的消癌平）作用7d，加MTT作用液，測OD值，計算藥物對腫瘤細胞生長的抑制率。抑制率=（對照組OD540-加藥組OD540）/對照組OD540×100%。回答下列問題：

（1）癌細胞增殖情況的判定可通過細胞計數，常采用血細胞計數法，若本實驗用的對數生長期細胞數量要達到5×106個/mL，則采用25（中）×16（小）規格，每小格高度0．10mm，面積1/100mm2的計數板，計數總數需達____________個癌細胞；此外癌細胞標志分泌物的檢查，也是臨床常用方法。本實驗中可取經培養后的癌細胞懸液，進行___________來檢測。

（2）請設計實驗結果記錄表___________。

（3）分析與討論：

①用流式細胞儀檢測消癌平針劑對人胃癌（SGC-7901）細胞的作用機理如下圖，則抑制作用在細胞周期___________時期，關于抑制作用方式，請你提出合理的假設____________________。

②若采用體內試驗的方法研究消癌平對人胃癌細胞治療作用，在將人胃癌（SGC-7901）細胞制備成的細胞凝塊接種到小鼠體內時，應對小鼠作____________處理。

③為了更全面地了解消癌平對癌細胞的治療效果，還可以從____________方面開展研究。（請答出2點）

Answer 1

【答案】400 離心后取細胞上清液 不同濃度消癌平對人胃癌SGC-7901細胞生長抑制作用的實驗結果記錄表

組別	OD540	抑制率%
空白對照（生理鹽水）
10mg/mL的消癌平
20mg/mL的消癌平
30mg/mL的消癌平
40mg/mL的消癌平
50mg/mL的消癌平

G1 消癌平抑制了DNA的復制，消癌平抑制了RNA的合成等 免疫抑制 如不同癌細胞種類；不同接種天數、細胞形態學觀察等

【解析】

本實驗的目的是研究消癌平對癌癥的作用效果，故實驗的自變量是不同濃度的消癌平，因變量是對癌細胞的抑制作用。

（1）該計數板每小格的體積是0.1×0.01=0.001 mm3，若本實驗用的對數生長期細胞數量要達到5×106個/mL，則每小格即0.001 mm3的細胞數目為5×106÷106=5個，該計數板的規格為25（中）×16（小），故計數時需要計數5個中方格即5×16=80個小方格的細胞數目，即80×5=400個，故計數總數需達400個癌細胞；癌細胞的分泌物經離心后處于上清液中，故本實驗中可取經培養后的癌細胞懸液，進行離心后取上清液來檢測。

（2）本實驗的自變量是不同濃度的消癌平，因變量是人胃癌SGC-7901細胞生長情況，故不同濃度消癌平對人胃癌SGC-7901細胞生長抑制作用的實驗結果記錄表如下：

組別	OD540	抑制率%
空白對照（生理鹽水）
10mg/mL的消癌平
20mg/mL的消癌平
30mg/mL的消癌平
40mg/mL的消癌平
50mg/mL的消癌平

（3）①由圖可知，消癌平處理后，處于復制過程中及復制完成的細胞比例減少，說明抑制作用很可能發生在細胞周期的G1期，可能是消癌平抑制了DNA的復制。

②由于人的胃癌（SGC-7901）細胞對于小鼠相當于是抗原，會誘發小鼠的免疫反應，故需要對小鼠進行免疫抑制處理，以降低免疫排斥反應。

③本實驗探究了不同濃度的消癌平對癌細胞的治療效果，還可以研究消癌平對不同癌細胞的作用，或不同接種天數的治療效果等。