Question

7．金黃色葡萄球菌具有高度耐鹽性，在血平板（培養基中添加適量血液）上生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，使其褪色．下面是某研究小組測定自來水中金黃色葡萄球菌濃度的實驗操作．請回答下列問題：
（1）金黃色葡萄球菌的培養基為7.5%NaCl牛肉膏蛋白胨培養基，此培養基能為金黃色葡萄球菌的生長提供碳源、氮源及水和無機鹽．培養基中加入7.5%NaCl利于金黃色葡萄球菌的篩選，原因是不影響金黃色葡萄球菌生長的同時抑制其它菌的生長．
（2）上述培養基的滅菌方法是高壓蒸氣滅菌法．在制作血平板時需等平板冷卻后，方可加入血液，以防止高溫破壞血細胞．血平板在使用前，需置于恒溫培養箱中一段時間的目的是檢測血平板是否符合無菌要求．
（3）取10mL自來水樣，加入90mL無菌水稀釋成10^-1稀釋自來水樣，依次操作，制作10^-2、10^-3、10^-4稀釋自來水樣．
（4）將0.1mL 10^-l～10^-4的四個稀釋樣液，分別接種到4組（每組3個）血平板上的方法是稀釋涂布平板法．在血平板上，金黃色葡萄球菌菌落的周圍會出現透明圈（溶血圈）．若在10^-3組的3個血平板上，金黃色葡萄球菌菌落數分別為39、38和37，則每升自來水中的活菌數約為3.8×10⁸．

Answer 1

分析 1、微生物的營養物質有5類，分別是水、無機鹽、碳源、氮源及生長因子．
2、培養基按功能分為選擇培養基和鑒別培養基：
①選擇培養基：培養基中加入某種化學物質，以抑制不需要的不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物生長，培養、分離出特定的微生物（如培養酵母菌和霉菌，可在培養基中加入青霉素；培養金黃色葡萄球菌，可在培養基中加入高濃度的食鹽）
②鑒別培養基：根據微生物的代謝特點，在培養基中加入某種指示劑或化學藥品，鑒別不同種類的微生物，如可用伊紅-美藍培養基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌（若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤）
3、接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落．

解答 解：（1）7.5%NaCl肉湯培養基中含有蛋白質，所以可以提供氮源和碳源，又含有水分和氯化鈉，所以提供的營養物質為碳源、氮源、水和無機鹽；7.5%NaCl不影響金黃色葡萄球菌生長的同時抑制其它菌的生長，因此培養基中加入7.5%NaCl利于金黃色葡萄球菌的篩選．
（2）對培養基的滅菌采用的是高壓蒸汽滅菌法．在制作血平板時需等平板冷卻后，方可加入血液，以防止高溫破壞血細胞．血平板在使用前，需置于恒溫培養箱中一段時間的目的是檢測血平板是否符合無菌要求．
（3）取10mL自來水樣，加入90mL無菌水稀釋成10^-1稀釋自來水樣，依次操作，制作10^-2、10^-3、10^-4稀釋自來水樣．
（4）將0.1mL 10^-l～10^-4的四個稀釋樣液，分別接種到4組（每組3個）血平板上的方法是稀釋涂布平板法．根據題意，“金黃色葡萄球菌在血平板（培養基中添加適量血液）上生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，使其褪色”，因此在血平板上，金黃色葡萄球菌菌落的周圍會出現透明圈（溶血圈）．若在10^-3組的3個血平板上，金黃色葡萄球菌菌落數分別為39、38和37，則每升（1L=10³ml）自來水中的活菌數約為（39+38+37）÷3÷10^-3×10³×10=3.8×10⁸．
故答案為：
（1）碳源、氮源       不影響金黃色葡萄球菌生長的同時抑制其它菌的生長
（2）高壓蒸氣滅菌法    高溫破壞血細胞     檢測血平板是否符合無菌要求
（3）90
（4）稀釋涂布平板法         透明圈（溶血圈）   3.8×10⁸

點評 設置對照的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結果的影響，提高實驗結果的可信度，對照實驗的設計的重點是單一變量原則，在本題中單一變量的原則的設計是在培養基中是否加入鮮牛奶．