Question

血栓主要由不溶性的纖維蛋白等物質組成．納豆激酶（NK）是一種在納豆發酵過程中由納豆菌產生的蛋白酶，它不但能直接作用于纖維蛋白（A過程），還能間接激活體內纖溶酶原（B過程）．如圖是有關納豆激酶溶栓機理簡圖，請據圖回答問題：

（1）人們所需的納豆激酶必需通過分離提純才能獲得，下面是分離提純的步驟，其基本順序是

 

．
①層析提純  ②過濾   ③沉淀   ④破碎細胞  ⑤酶制劑  ⑥冷凍干燥
使酶蛋白沉淀通常采用改變pH或加入

 

．
（2）研究NK直接水解作用：給定纖維蛋白平板，將

 

滴加其上，若出現相應的溶解圈，則可說明

 

．
（3）NK 的間接作用是通過

 

激活體內纖溶酶原，增加纖溶酶的量和作用，溶解血栓．
（4）請根據下列給出的實驗材料，比較NK與內源性纖溶酶溶栓效果，并在表格空白位置上，補全相應內容．
供選實驗材料：NK溶液、內源性纖溶酶溶液、纖維蛋白塊、蛋清溶液，緩沖液、雙縮脲試劑、量筒、試管和秒表．
實驗步驟：（“+”表示添加，“-”表示未添加）

	加入物質的成分	試管1	試管2
1	A	+	+
2	緩沖液	+	+
3	納豆激酶（NK）溶液	+	-
4	B	-	+

2格中A處添加的物質是

 

，B處添加的物質是

 

．
②實驗結果的鑒定所用的觀察方法是

 

．

Answer 1

考點：蛋白質的提取和分離,蛋白質的結構和功能的綜合

專題：

分析：本題是對蛋白質的提取和分離過程、探究NK與內源性纖溶酶溶栓效果的實驗的綜合性考查，回憶蛋白質的提取和分離過程，結合題干和題圖信息解答（1）、（2）、（3）題；對于（4），可以從實驗目的出發分析實驗的自變量、因變量和無關變量，按照實驗設計的單一變量原則和對照原則完善實驗步驟預期實驗結果獲取結論．

解答： 解：（1）由題意知，納豆激酶（NK）是由納豆菌產生的蛋白酶，因此納豆激酶分離提純的過程是先破碎細胞釋放納豆激酶，然后經過過濾、沉淀，層析提純，再通過冷凍干燥獲得酶制劑；使酶蛋白沉淀的常用方法是改變PH或加入硫酸銨．
（2）分析題圖可知，納豆激酶（NK）能直接作用于纖維蛋白，使纖維蛋白降解；將納豆激酶（或NK）滴加在給定纖維蛋白平板上，可以檢驗納豆激酶（NK）直接降解纖維蛋白的作用，如果現相應的溶解圈，說明NK對纖維蛋白有直接水解作用或降解作用（NK在體外有溶栓效果）．
（3）分析題圖可知，納豆激酶（或NK）可以刺激血管上皮細胞，使血管上皮細胞釋放組織纖溶酶原激活劑激活體內纖溶酶原，增加纖溶酶的量和作用，溶解血栓．
（4）①分析題干信息可知，該實驗的目的是比較NK與內源性纖溶酶溶栓效果，因此實驗的自變量是酶的種類，因變量是纖維蛋白塊的消失的時間，其他如試驗用的纖維蛋白塊大小、緩沖液的濃度和體積、酶的濃度和體積屬于無關變量，無關變量應該保持一致．，因此A處加入的物質應該是纖維蛋白塊，B加入的物質是內源性纖溶酶溶液．
②通過比較蛋白塊消失的時間的長短比較NK與內源性纖溶酶溶栓效果．
故答案為：
（1）④②③①⑥⑤硫酸銨
（2）納豆激酶（或NK）       NK對纖維蛋白有直接水解作用或降解作用（NK在體外有溶栓效果）
（3）刺激血管上皮細胞，釋放組織纖溶酶原激活劑
（4）①纖維蛋白塊、內源性纖溶酶溶液   
 ②觀察記錄蛋白塊消失的時間

點評：對本題的知識點是蛋白質的提取和分離過程，對實驗變量的分析和控制，實驗設計的對照原則與單一變量原則，對相關知識點的掌握和應用并把握知識點間的內在聯系是解題的關鍵．