Question

【題目】有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株。回答問題：

（1）在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以_______為唯一碳源的固體培養基上。從功能上講，該培養基屬于________培養基。

（2）純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即_________和______________。接種時所用的接種環通過________滅菌，在第二次及其后的劃線操作時，總是從________________開始劃線，該分離純化方法稱_____________法。

（3）為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力________。

（4）通常情況下，在微生物培養過程中，實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、________和_________________。無菌技術要求實驗操作應在酒精燈________附近進行，以避免周圍環境中微生物的污染。

Answer 1

【答案】原油 選擇 平板劃線法 稀釋涂布平板法 灼燒 上一次的末端 平板劃線法 強 干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 火焰

【解析】

（1）培養基的營養構成：各種培養基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽。培養基的分類：①按物理性質分，分為液體培養基和固體培養基，固體培養基中含有凝固劑，一般是瓊脂。②按化學成分分，分為天然培養基和合成培養。兩者的區別是天然培養基成分不確定，合成培養基成分的含量是確定的。③按用途分，分為選擇培養基和鑒別培養基。選擇培養基主要是培養、分離特定的微生物，如培養酵母菌可在培養基中加入青霉素；鑒別培養基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅-美藍培養基，如果菌落呈黑色，并帶有金屬光澤，說明有大腸桿菌。

（2）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法。

（3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體—菌落。

（1）欲篩選出能降解原油的菌株，培養基中應只含有原油而無其它碳源，不能降解原油的細菌在此培養基上不能生存，從功能上講，這類培養基屬于選擇培養基。

（2）分離純化菌種時，常采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，使聚集在一起的細菌細胞分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個的菌落，以便純化菌種。接種時所用的接種環通過灼燒滅菌，在第二次及其后的劃線操作時，總是從上一次的末端開始劃線，該分離純化方法稱平板劃線法。

（3）降解原油能力越強的菌株，在菌落周圍形成的分解圈越大。

（4）實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌（如接種環）、干熱滅菌（如培養皿）、高壓蒸汽滅菌（如培養基）等。無菌操作要求在整個實驗過程中操作都在酒精燈火焰附近進行，以避免周圍微生物的污染。