下列關于基因工程的說法中，不正確的是 （ ）
A．將目的基因和運載體連接起來需要用DNA連接酶
B．質粒是常用的運載體
C．質粒是一些能自主復制的小型環狀DNA
D．酵母菌細胞中提取到人的干擾素mRNA，說明目的基因表達成功
科目：高中生物 來源：上海市十三校2012屆高三第二次聯考生物試題 題型：071
回答下列關于基因工程的相關問題。
質粒是基因工程中的一種常用的工具之一，經修飾改造后的質粒如下圖七一1所示。PUC118上的Lacz基因編碼β半乳糖苷酶的一條多肽鏈，其表達產物與菌落顏色有關；經“修飾”后的“多克隆位點”位于LacZ基因之中。AmpR是抗氮卞青霉素基因。
1．PUC118上的基因AmpR作用的是：________“多克隆位點”中含有多種限制酶的識別序列，如HindⅢ，其切割后產生的DNA片斷中含有的部分序列是
，則限制酶HindⅢ的識別序列是________。
2．圖2示意將目的基因導入大腸桿菌的操作步驟。其中，I～V表示操作過程；A－F表示使用的相關工其，其中的E1和E2表示有關的酶。試問：E2應是________（酶）；經過E2的切割，供體染色體中的DNA片段中游離的磷酸基團總數的變化是：________。
在策略上，圖1中的“多克隆位點”包含了多種、多個識別序列，請說出設計這種“多克隆位點”的目的：________。
3．LacZ基因可以使細菌在含有X－gttl（5－溴－4－氯－3－吲哚－B－D－半乳糖）底物和IPTG（一種乳糖類似物）的培養基上形成藍色的菌落，即X－gal被lacZ基因編碼產生的鼻半乳糖昔酶水解成藍色；若要形成重組質粒，則在含X－gal的培養基上將形成白色菌落（而不是藍色的）。
請據圖2分析下列問題：
①用本無PUC118的大腸桿菌作為受體細胞，將培養瓶C中被連接處理后的DNA混合物傾入含X－gal、IPTG和________的D培養基平板上，其目的是________。
菌落生長結果圖2中所示。
②過程V進行轉移培養，則該應該挑選X、Y、Z中的________菌落進行液體培養。形成該顏色的生理原因是________。如此目的基因便被克隆了！
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