Question

【題目】如圖是純化纖維素分解菌并生產乙醇的基本工作流程，請回答下列問題:

（1）圖中①過程選取富含纖維素的土壤，在鑒定和篩選所需微生物時需用____________對纖維素進行染色并制成選擇培養基。最后還要在平板培養基上分離純化目的菌。為避免雜菌污染培養物和環境，接種時要在________旁操作。

（2）圖中②環節獲得的酶是一種復合酶，一般認為它至少包括三種組分，分別為C1酶、CX酶和________。前兩種酶使纖維素分解成________，第三種酶將其進一步分解成葡萄糖。⑤環節常用的菌種是________。

（3）用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中纖維素分解菌數量。在對應稀釋倍數為106的培養基中，取0.2ml稀釋液涂布，得到以下統計結果；涂布了三個平板，統計的菌落數是210、240和246；請計算每毫升原液中的菌體數是________。用這種方法測得的菌體數比實際活菌數量________。

Answer 1

【答案】剛果紅酒精燈火焰旁葡萄糖苷酶纖維二糖酵母菌1.16×109 少

【解析】

題圖中表示利用纖維素分解菌提取纖維素酶，并利用這種酶分解纖維素以得到葡萄糖，最后利用葡萄糖進行酒精發酵的過程。在鑒定和篩選這種細菌時，選擇富含纖維素的土壤較易獲得目的菌種，同時需要用到選擇培養基，如剛果紅能和纖維素結合形成紅色復合物，目的菌種能在含剛果紅的選擇培養基中形成透明圈，從而達到篩選目的。分析題圖：①表示纖維素分解菌的篩選，②表示纖維素酶的活性鑒定，③表示纖維素發酵，④表示接種酵母菌，⑤表示無氧發酵產生乙醇。

（1）分析圖解可知，圖中①過程表示纖維素分解菌的篩選，因此選取產酶微生物時應選擇富含纖維素的土壤，在鑒定和篩選這種微生物時需用剛果紅對纖維素進行染色并制成選擇培養基。最后還要在平板培養基上分離純化目的菌。為避免雜菌污染培養物和環境，接種時要在酒精燈火焰旁旁操作。

（2）從目的菌種中得到的纖維素酶一般認為至少包括三種組分別為C酶、C酶和葡萄糖苷酶。前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。⑤過程表示無氧發酵產生乙醇的過程，此過程需要用酵母菌作為菌種。

（3））涂布的三個平板的菌落的平均值為（210+240+246）/3=232個。每毫升原液中的菌體數是232/0.2×106=1.16×109個，由于兩個或多個細菌連在一起時，看到的是一個菌落，因此用這種方法測得的菌體數比實際活菌數量少。