Question

1．毛角蛋白Ⅱ型中間絲（KIFⅡ）基因與絨山羊的羊絨質量密切相關．獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊的簡單流程如圖．

（1）過程①中最常用的運載工具是質粒，所需要的酶是限制酶和DNA連接酶．
（2）在過程②中，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理將皮膚組織塊分散成單個成纖維細胞．在培養過程中，將成纖維細胞置于5% CO₂的氣體環境中，CO₂的作用是維持培養基的pH．
（3）在過程③中，用促性腺激素處理以獲取更多的卵（母）細胞．成熟卵（母）細胞在核移植前需要進行去核處理．過程④常用的方法是顯微注射．
（4）從重組細胞到早期胚胎過程中所用的胚胎工程技術是早期胚胎培養．在胚胎移植前，通過胚胎分割技術可獲得較多胚胎．
（5）請用最恰當科學的名字給培育成功的小羊命名轉基因克隆絨山羊．

Answer 1

分析 根據題意和圖示分析可知：圖示表示獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊的簡單流程圖，其中①表示基因表達載體的構建過程，該過程需要限制酶和DNA連接酶；②表示動物細胞培養過程，該過程需要采用胰蛋白酶處理組織塊以獲得單個細胞；③表示卵母細胞的采集和培養過程；④表示重組表達載體導入成纖維細胞．

解答 解：（1）基因工程中，運載工具包括質粒、噬菌體及動植物病毒等，其中質粒是主要運載工具；①表示基因表達載體的構建過程，首先需要限制酶切割含有目的基因的DNA和運載體DNA，再用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組質粒．
（2）胰蛋白酶可將組織塊分散成單個細胞；動物細胞培養過程中需要一定的氣體環境（95%氧氣和5%二氧化碳），其中5%CO₂的作用是維持培養基（液）的pH．
（3）要得到更多的卵（母）細胞需用促性腺激素對動物進行超數排卵處理；成熟卵（母）細胞在核移植前需要進行去核處理，以保證克隆后代的遺傳性狀主要來自于供體核．過程④是將外源基因導入受體細胞，常用的方法是顯微注射．
（4）從重組細胞到早期胚胎需要才用早期胚胎培養技術；在胚胎移植時，可通過胚胎分割技術獲得更多的胚胎．
（5）由于最終獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊，所以培育成功的小羊為轉基因克隆絨山羊．
故答案為：
（1）質粒　DNA連接酶
（2）胰蛋白酶或膠原蛋白酶  　維持培養基的pH
（3）促性腺激素　去核    顯微注射
（4）早期胚胎培養　胚胎分割
（5）轉基因克隆絨山羊

點評 本題結合轉基因山羊培育過程圖，考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關知識，要求考生識記所列知識要點，能準確判斷圖中各過程的名稱，并能在較簡單的情境中使用，屬于考綱識記層次的考查．