Question

33．(8分)研究發現僅在大豆葉肉細胞中存在一種多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGP)，它能夠特異性地抑制部分致病真菌細胞內的多聚半乳糖醛酸酶的活性，從而減弱病原菌對植株的侵害。研究人員成功地將PGP基因導入小麥體內，以期獲得抗根腐病能力更高的小麥新品種。請分析回答問題：

(1)反轉錄法是基因工程中獲得目的基因的常用方法，本研究中獲取模板RNA的大豆細胞最好取自_____________，在提取RNA過程中要特別注意防止RNA的水解，試提出一種保護措施：_____________。

(2)目的基因的擴增常采用PCR技術，而PCR引物的設計是獲得大量高純度目的基因的關鍵。引物中堿基數量越多，則引物的特異性越_____________。

(3)右圖是本研究使用的質粒載體pAHC25的酶切圖譜。用限制酶Sac I和BamH I同時處理pAHC25，結果會產生_____________種不同的片段。在構建含PGP基因的表達載體時，分析質粒酶切圖譜，研究人員選擇了有單一酶切點的限制酶Sma I和Sac I作為本研究的工具酶，其優點是_____________。

(4)研究人員用基因槍法轉化該小麥的幼胚細胞，選擇幼胚細胞的原因是_____________，容易誘導形成植株。

Answer 1

33．（8分）（1）大豆葉肉   在低溫條件下快速提取（或加入適量的RNA酶抑制劑）

（2）高(2分)   （3）3  可以保證目的基因插入部位和方向的準確（2分） 

（4）分裂旺盛，全能性高［來