Question

【題目】研究發現，許多癌細胞表面會出現高親和力的促性腺激素釋放激素（LHRH）受體。某研究所構建了一種導向治療癌癥的藥物——重組人促性腺激素釋放激素-綠膿桿菌外毒素A融合蛋白（LHRH-PE40），目前已完成臨床前研究。

（1）促性腺激素釋放激素（LHRH）由_______分泌，與相關垂體細胞膜表面的特異性__________結合并調節其細胞分泌促性腺激素，進而調節相關腺體的激素分泌，該過程體現了激素分泌的___________調節。

（2）綠膿桿菌外毒素A(PEA)是綠膿桿菌的主要毒力因子，它必須在進入細胞后才發揮毒性作用，殺死細胞。PEA有PEA受體結合區、越膜區和毒性區三個功能區。LHRH-PE40是利用基因工程的方法將LHRH基因和去除_____________區的所對應的基因片段在體外重組后，導入大腸桿菌表達產生的。

（3）為了研究LHRH-PE40與人結腸癌細胞膜蛋白特異性結合的最適加入量。科研人員用125I標記的LHRH-PE40和人結腸癌細胞膜蛋白進行結合實驗。結果如下圖所示。

注：—▲—TB：125I-LHRH-PE40與癌細胞膜蛋白的總結合量

—■—NB：125I-LHRH-PE40與癌細胞膜蛋白的非特異性結合量（非特異性結合是指激素結合到受體蛋白除特異性結合位點之外的其它部位）。

據圖分析可知125I _LHRH-PE40可作為其與人結腸癌細胞膜蛋白特異性結合的最適加入量是______萬CPM，作出此判斷的依據是____________________。

（4）為了進一步驗證：“LHRH-PE40特異性結合的對象為LHRH受體”，科研人員以人結腸癌細胞膜蛋白作為實驗材料，并先后添加相關藥品進行實驗。（注：藥品A-D均溶于E）

A.125I-LHRH B.LHRH-PE40 C.LHRH D. LHRH受體 E.緩沖液

分組	先加藥品	后加藥品	測量指標
實驗組	藥品1	藥品3	檢測膜蛋白與藥物結合后的放射性
對照組1	E
對照組2	藥品2

①藥品1、2、3分別是_______（填字母）。

②若實驗結果為__________，則證明“LHRH-PE40特異性結合的對象為LHRH受體”的說法正確。

③若將LHRH-PE40作為治療結腸癌的臨床藥物，需要補充的數據是______。

Answer 1

【答案】下丘腦 受體 分級調節 PEA受體結合區 80 特異性結合量較低，且和總結合量差值最大（加入量最少） B C A 實驗組的放射性和對照組2大致相同，且明顯低于對照組1 藥物是否保留了PEA毒性的實驗數據，對人體的臨床實驗的數據，藥物對其它正常細胞尤其是垂體細胞是否有毒害作用的實驗數據，藥物是否會引發體液免疫或過敏的實驗數據，藥物在機體是否會被降解，降解速率的相關研究數據等。

【解析】

1、性激素的分級反饋調節：下丘腦通過釋放促性腺激素釋放激素，來促進垂體合成和分泌促性腺激素，促性腺激素則可以促進性腺的活動，合成和釋放性激素，當性激素達到一定濃度后，這個信息又會反饋給下丘腦和垂體，從而抑制兩者的活動，這樣性激素就可以維持在相對穩定水平。

2、分析圖示可知：當放射性標記物加入量較低時，總結合量與非特異性結合量差值不大，在放射性標記物加入量為80萬CPM時，能保證在加入量最少的情況下，總結合量與非特異性結合量差值最大，且隨著放射性標記物加入量增大時，總結合量與非特異性結合量差值變化不大。

（1）促性腺激素釋放激素由下丘腦合成分泌，通過血液運輸，與垂體細胞膜表面的特異性受體結合并調節其細胞分泌促性腺激素，進而調節相關腺體的激素分泌，該過程體現了激素分泌的分級調節。

（2）綠膿桿菌外毒素A(PEA)是綠膿桿菌的主要毒力因子，它必須在進入細胞后才發揮毒性作用，殺死細胞，為了防止綠膿桿菌外毒素A(PEA)進入受體細胞并發揮毒性作用導致受體細胞死亡，我們可去除PEA受體結合區，故LHRH-PE40是利用基因工程的方法，將LHRH基因和去除PEA受體結合區的所對應的基因片段在體外重組后，導入大腸桿菌表達產生的。

（3）據圖可知，在放射性標記物加入量為80萬CPM時，能保證在加入量最少的情況下，總結合量與非特異性結合量差值最大，故125I-LHRH-PE40可作為其與人結腸癌細胞膜蛋白特異性結合的最適加入量是80萬CPM。

（4）①該實驗的目的時進一步驗證“LHRH-PE40特異性結合的對象為LHRH受體”，故實驗組中應加入藥品LHRH-PE40，對照組2中加入等量的LHRH，對照組1可加等量的溶劑E，然后三組都加入相同的125I-LHRH，故藥品1、2、3分別是LHRH-PE40、LHRH、125I-LHRH，即B、C、A。

②若LHRH-PE40特異性結合的對象與LHRH結合的對象一樣為LHRH受體，則實驗組和對照組2中的腸癌細胞膜蛋白與125I-LHRH結合的將減少，所以若實驗組的放射性和對照組2大致相同，且明顯低于對照組1，則證明LHRH-PE40特異性結合的對象為LHRH受體。

③若將LHRH-PE40作為治療結腸癌的臨床藥物，還需要補充藥物是否保留了PEA毒性的實驗數據，對人體的臨床實驗的數據，藥物對其它正常細胞尤其是垂體細胞是否有毒害作用的實驗數據，藥物是否會引發體液免疫或過敏的實驗數據，藥物在機體是否會被降解，降解速率的相關研究數據等。