Question

(6分)科研人員為探究誘導酵母原生質體攝取蠶豆葉綠體的適宜條件，進行了如下實驗。

① 提取蠶豆葉綠體：過濾蠶豆新鮮葉片研磨液，對濾液進行_A_后獲得葉綠體，加入2 mL 0.35 mol·L^－1氯化鈉溶液，制成懸浮液。

② 制備酵母原生質體：在適宜條件下用2%的蝸牛酶處理酵母菌，獲得酵母原生質體。

③ 誘導酵母原生質體攝取蠶豆葉綠體：將酵母原生質體與蠶豆葉綠體混和后，在不同溫度和pH下用聚乙二醇(PEG)處理60 min后洗滌。用顯微鏡觀察，結果如下表：

實驗組別	溫度	pH	酵母原生質體數(shù)/mL	含葉綠體的酵母原生質體數(shù)/mL
1	30℃	7.6	760	4
2	37℃	7.6	1 100	7
3	37℃	6.0	1 250	5
4	37℃	10.2	990	3

請回答：

(1)補全實驗步驟：A ________________________。

(2)步驟①中加入0.35 mol·L^－1氯化鈉的作用是________________________。

(3)步驟②中蝸牛酶的作用是除去酵母細胞的________________。

(4)實驗結果表明酵母原生質體攝取蠶豆葉綠體較適宜條件是________________。在適宜溫度下，酵母原生質體容易攝入葉綠體與細胞膜的______________增強有關。

 

Answer 1

【答案】

(6分)(1)(差速)離心　    (2)維持葉綠體的正常形態(tài)(防止葉綠體吸水脹破)

(3)細胞壁    (4)溫度為37℃，pH為7.6(2分)　流動性

【解析】

試題分析：

解析：（1）由于酵母原生質體失去了細胞壁的保護而容易吸水脹破，因此，需要選擇等滲（或略高滲）溶液（0.35mol/L NaCl溶液）保存原生質體，以保持原生質體的正常形態(tài)和活性。（2）當酵母原生質體成功攝取葉綠體后，可以在光學顯微鏡下觀察到原生質體中有綠色顆粒（葉綠體）。（3）葉綠體是光合作用的場所，若葉綠體能在酵母原生質體中正常代謝，則該酵母原生質體就可能會由原先的異養(yǎng)轉變?yōu)樽责B(yǎng)，最終培育的酵母細胞就可因能自養(yǎng)而獨立生活。

評講中還可進行適當延伸，如當酵母原生質體成功攝取葉綠體后，酵母原生質體長出新細胞壁的時期、如何確定葉綠體能否在酵母菌細胞中長期存在并傳遞給后代等，以拓展學生的思維。

考點：本題以“酵母原生質體攝取葉綠體的條件研究”為背景，考查原生質體及葉綠體的制備方法、誘導生物膜融合的方法及原理，以及相關實驗分析能力。